黃瓜澇脅迫下超微結(jié)構(gòu)變化及差異蛋白組學(xué)研究.pdf

1、澇脅迫是人類所面臨的最嚴(yán)重的自然災(zāi)害之一，嚴(yán)重制約植物的生長(zhǎng)。黃瓜是我國(guó)第三大廣泛栽培蔬菜，根系淺，通氣組織不發(fā)達(dá)，極易受到澇脅迫危害。本研究以耐澇黃瓜品系‘早二N’為材料，電鏡對(duì)澇脅迫下黃瓜超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，利用iTRAQ技術(shù)對(duì)澇脅迫誘導(dǎo)的差異蛋白質(zhì)進(jìn)行研究，以期揭示黃瓜應(yīng)對(duì)澇脅迫生理機(jī)制和分子生物學(xué)機(jī)理，主要研究結(jié)果如下:
　　1、淹澇對(duì)早二N粒體結(jié)構(gòu)影響較小，進(jìn)一步加瓊脂淹澇后，線粒體膜結(jié)構(gòu)消失，內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生降解，內(nèi)嵴消失;

2、淹澇后葉綠體被壓縮變形，片層結(jié)構(gòu)逐漸松散，且脅迫強(qiáng)度加大，片層結(jié)構(gòu)松散越快;氣孔隨澇脅迫時(shí)間增長(zhǎng)逐漸閉合，兩種不同脅迫強(qiáng)度下，初期差異不明顯，在淹澇后期差異較為顯著。
　　2、本次iTRAQ試驗(yàn)共檢測(cè)到5574個(gè)蛋白，淹澇和加瓊脂淹澇兩個(gè)處理中檢測(cè)到差異蛋白分別為97和87個(gè);檢測(cè)到差異蛋白主要參與的生物進(jìn)程為細(xì)胞過程(cellular process)和應(yīng)激響應(yīng)(response to stimulus)，主要分子功能是結(jié)合(b

3、inding)和催化活性(catalytic activity)。COG功能分類結(jié)果表明，在加瓊脂淹澇中，碳水化合物運(yùn)輸和代謝蛋白變多。
　　3、淹澇和加瓊脂淹澇下共有差異蛋白44個(gè)，能進(jìn)行功能預(yù)測(cè)的有34個(gè)蛋白，在加瓊脂淹澇中繼續(xù)上調(diào)或下調(diào)有21個(gè)蛋白;加瓊脂淹澇后獨(dú)有的參與應(yīng)急響應(yīng)的上調(diào)差異蛋白有13個(gè)。
　　4、對(duì)候選差異蛋白進(jìn)行qRT-PCR表達(dá)驗(yàn)證，結(jié)果表明富含半胱氨酸的類受體蛋白激酶26、UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶92A