小麥抗葉銹近等基因系TcLr分子標(biāo)記開發(fā)與凝集素類受體蛋白激酶基因的克隆.pdf

1、由小麥葉銹菌(Puccinia triticina Eriks.)引起的小麥葉銹病是影響世界小麥穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要病害之一,也是影響我國(guó)小麥生產(chǎn)的重要因素?？谷~銹病基因的應(yīng)用成為防治該病害最經(jīng)濟(jì)、有效的方法。小麥抗葉銹病基因Lr45來(lái)源于日本小黑麥,目前我國(guó)尚無(wú)關(guān)于克服該基因的葉銹菌株的報(bào)道,因此,Lr45為我國(guó)小麥葉銹菌有效的抗病基因,具有一定的應(yīng)用潛力。本研究通過(guò)分子標(biāo)記以及抗病相關(guān)基因克隆的方法對(duì)小麥抗葉銹病基因Lr45進(jìn)行研究,為該

2、基因的分子鑒定以及抗病相關(guān)機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。本論文主要結(jié)果包括以下幾個(gè)方面:1、利用定位在黑麥2R染色體的3個(gè)SSR標(biāo)記、6個(gè)RAPD標(biāo)記、1個(gè)STS標(biāo)記以及小麥2A染色體上的4個(gè)EST-SSR標(biāo)記、31個(gè)SSR標(biāo)記篩選與Lr45連鎖的分子標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)黑麥2R染色體上的SSR標(biāo)記SCM43、SCM75和小麥2A染色體上的SSR標(biāo)記WMC63在親本。TcLr45與Thatcher之間表現(xiàn)多態(tài)性。
　　 2、利用小麥抗葉銹病基因L

3、r25的SCAR標(biāo)記Lx25F20／Lr25R19對(duì)同樣來(lái)源于黑麥的小麥抗葉銹近等基因系TcLr26、TcLr45和TcLr25以及感病對(duì)照Thatcher進(jìn)行檢測(cè),僅在TcLr45中擴(kuò)增出一條1859bp的條帶。經(jīng)52個(gè)小麥抗葉銹近等基因系以及6個(gè)普通小麥、5個(gè)黑麥和3個(gè)小黑麥品種的驗(yàn)證,更正該標(biāo)記為小麥抗葉銹近等基因系TcLr45特異的分子標(biāo)記,命名為L(zhǎng)R45R／F,遺傳距離為14cM。避免了該標(biāo)記今后在分子輔助選擇中的錯(cuò)誤使用。<

4、br>　　 3、首次利用EST-CAPS技術(shù)對(duì)小麥抗葉銹近等基因系TcLr45及感病親本Thatcher進(jìn)行多態(tài)性分析。2A染色體短臂C-2AS5-0.78區(qū)域的25對(duì)EST引物中有2對(duì)引物在親本之間擴(kuò)增出差異,100個(gè)引物／酶切組合中有4組在TcLr45和Thatcher之間表現(xiàn)多態(tài)性。
　　 4、根據(jù)已克隆的小麥抗葉銹病基因Lr34序列中的凝集素類受體蛋白激酶基因設(shè)計(jì)引物,在小麥抗葉銹近等基因系TcLr45的cDNA中擴(kuò)增