鵝脂蛋白脂酶（LPL）cDNA序列克隆及其在動物脂肪酶超家族中的進(jìn)化研究.pdf

1、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase，LPL)是脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵酶。本實驗從天府肉鵝腿肌中抽取總RNA，通過RT-PCR反應(yīng)擴(kuò)增LPL基因的部分mRNA序列，分析LPL基因的結(jié)構(gòu)特征及序列變異特點，探討LPL基因的結(jié)構(gòu)與功能及其在脂肪酶超家族基因間的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系。結(jié)果表明： 1、獲得的LPL基因序列長度為879bp，GenBank登錄號為EF620913編碼293個氨基酸，核苷酸序列與雞LPL的mRNA具有92-38

2、％的相似性，與其它物種的序列也具有較高的相似性。 2、鵝LPL基因的氨基酸組成包含20種氨基酸，其中亮氨酸含量(8.90％)最高，賴氨酸(7.88％)次之，色氨酸(1.37％)和蛋氨酸(1.74％)含量較低；鵝LPL基因293個氨基酸序列與雞LPL基因間存在13個氨基酸位點的變異，占全部位點的4.44％：與哺乳動物間存在91個氨基酸變異位點，其中單態(tài)變異位點44個，占總變異位點數(shù)的48.35％。 3、在天府肉鵝LPL蛋白

3、中，α-螺旋(α-helix)所占的比例較高，為31.85％，擴(kuò)展鏈(Extended strand)的比例為20.89％，無規(guī)卷曲(Random coil)的比例為47.26％，三者交替分布，形成LPL蛋白的二級結(jié)構(gòu)。 4、天府肉鵝LPL結(jié)構(gòu)中存在4個二硫鍵、3個N-鏈接糖基化位點、1個肝素結(jié)合位點、1個脂蛋白酶催化三聯(lián)體位點、1個脂質(zhì)結(jié)合位點、1個介導(dǎo)脂蛋白與LDL受體結(jié)合的位點，1個PLAT結(jié)構(gòu)域和1個對LPL二聚體形成必