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文檔簡介
1、為了改進三疣梭子蟹人工養(yǎng)殖及遺傳育種工作,本文利用公共數(shù)據(jù)庫法開發(fā)了三疣梭子蟹多態(tài)性微衛(wèi)星標記,并通過這些微衛(wèi)星標記及 AFLP技術(shù)對其生長性狀進行相關(guān)性分析,利用分子標記輔助選育提高三疣梭子蟹養(yǎng)殖產(chǎn)量。
本研究通過公共數(shù)據(jù)庫法篩選三疣梭子蟹多態(tài)性微衛(wèi)星位點,首先通過軟件SRHUNTER13.0查找含有微衛(wèi)星的序列,最終得到1578條含有微衛(wèi)星的EST序列。選取150條EST序列使用Primer5.0設(shè)計微衛(wèi)星引物,其中27個
2、微衛(wèi)星位點具有豐富的多態(tài)性。遺傳多樣性分析結(jié)果表明每個微衛(wèi)星位點的等位基因數(shù)目從3-14個不等,等位基因平均數(shù)目為6.8個,觀測雜合度(Ho)的范圍從0.233-1.000,期望雜合度(He)的范圍從0.160-0.789,PIC值的范圍為0.222-0.875。
利用本研究開發(fā)的微衛(wèi)星位點以及 AFLP技術(shù),對三疣梭子蟹 Y1單對家系的F1代進行生長性狀進行相關(guān)性分析。經(jīng)過多態(tài)性檢測,有10個微衛(wèi)星位點在 F1代中表現(xiàn)出多態(tài)
3、性,AFLP技術(shù)中篩選出13對多態(tài)性位點清晰的引物組合,并得到85個多態(tài)性位點。采用軟件 SPSS19.0分析10個S S R位點及85個AFLP位點與生長性狀之間的相關(guān)性。
結(jié)果表明:有3個微衛(wèi)星位點,與各生長性狀存在顯著性差異。其中,位點PT101,與體重、體高、長甲寬、甲寬、大螯長節(jié)長、不動指長顯著相關(guān)(P<0.05),與體長、第一步足長極顯著相關(guān)(P<0.01);而位點 PT39,僅與體高顯著相關(guān)(P<0.05);位點
4、 PT74僅與第一步足長極顯著相關(guān)(P<0.01)。有10個AFLP位點與各生長性狀存在顯著差異。其中位點 A4f450,與體重、體高、體長、長甲寬、甲寬、大螯長節(jié)長、不動指長顯著相關(guān)(P<0.05);位點 A4f178,與體長、體高、長甲寬體著相關(guān)(P<0.05),與第一步足長極顯著相關(guān)(P<0.01);位點 D4f140,與甲寬、體重、體高、不動指長、長甲寬、大螯長節(jié)長顯著相關(guān)(P<0.05);位點D3f190,與體重、長甲寬、甲寬
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