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文檔簡介
1、為了改進(jìn)三疣梭子蟹人工養(yǎng)殖及遺傳育種工作,本文利用公共數(shù)據(jù)庫法開發(fā)了三疣梭子蟹多態(tài)性微衛(wèi)星標(biāo)記,并通過這些微衛(wèi)星標(biāo)記及 AFLP技術(shù)對(duì)其生長性狀進(jìn)行相關(guān)性分析,利用分子標(biāo)記輔助選育提高三疣梭子蟹養(yǎng)殖產(chǎn)量。
本研究通過公共數(shù)據(jù)庫法篩選三疣梭子蟹多態(tài)性微衛(wèi)星位點(diǎn),首先通過軟件SRHUNTER13.0查找含有微衛(wèi)星的序列,最終得到1578條含有微衛(wèi)星的EST序列。選取150條EST序列使用Primer5.0設(shè)計(jì)微衛(wèi)星引物,其中27個(gè)
2、微衛(wèi)星位點(diǎn)具有豐富的多態(tài)性。遺傳多樣性分析結(jié)果表明每個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的等位基因數(shù)目從3-14個(gè)不等,等位基因平均數(shù)目為6.8個(gè),觀測(cè)雜合度(Ho)的范圍從0.233-1.000,期望雜合度(He)的范圍從0.160-0.789,PIC值的范圍為0.222-0.875。
利用本研究開發(fā)的微衛(wèi)星位點(diǎn)以及 AFLP技術(shù),對(duì)三疣梭子蟹 Y1單對(duì)家系的F1代進(jìn)行生長性狀進(jìn)行相關(guān)性分析。經(jīng)過多態(tài)性檢測(cè),有10個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)在 F1代中表現(xiàn)出多態(tài)
3、性,AFLP技術(shù)中篩選出13對(duì)多態(tài)性位點(diǎn)清晰的引物組合,并得到85個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)。采用軟件 SPSS19.0分析10個(gè)S S R位點(diǎn)及85個(gè)AFLP位點(diǎn)與生長性狀之間的相關(guān)性。
結(jié)果表明:有3個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn),與各生長性狀存在顯著性差異。其中,位點(diǎn)PT101,與體重、體高、長甲寬、甲寬、大螯長節(jié)長、不動(dòng)指長顯著相關(guān)(P<0.05),與體長、第一步足長極顯著相關(guān)(P<0.01);而位點(diǎn) PT39,僅與體高顯著相關(guān)(P<0.05);位點(diǎn)
4、 PT74僅與第一步足長極顯著相關(guān)(P<0.01)。有10個(gè)AFLP位點(diǎn)與各生長性狀存在顯著差異。其中位點(diǎn) A4f450,與體重、體高、體長、長甲寬、甲寬、大螯長節(jié)長、不動(dòng)指長顯著相關(guān)(P<0.05);位點(diǎn) A4f178,與體長、體高、長甲寬體著相關(guān)(P<0.05),與第一步足長極顯著相關(guān)(P<0.01);位點(diǎn) D4f140,與甲寬、體重、體高、不動(dòng)指長、長甲寬、大螯長節(jié)長顯著相關(guān)(P<0.05);位點(diǎn)D3f190,與體重、長甲寬、甲寬
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