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文檔簡介
1、目的:觀察表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)對抑制地塞米松誘導體外培養(yǎng)兔晶狀體上皮細胞凋亡的作用,從而探討EGCG 對晶狀體糖皮質(zhì)激素損傷進行藥物治療的可行性。 研究方法:采用體外培養(yǎng)正常家兔晶狀體,按隨機分組原則將家兔晶狀體分為以下4 組:空白對照組(A);地塞米松(10μmol/L)處理組(B);地塞米松和不同濃度EGCG(10mmol/L、20mmol/L)處理組(C1、C2)。分別于3 天、5 天、7 天培養(yǎng)結(jié)束后觀察
2、各組晶狀體的透明度,可見光分光度法測定晶狀體組織的總抗氧化能力(T-AOC)、鈉鉀ATP 酶(Na+-K+ATP)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px) 活性的變化;對凋亡細胞予以確認和進行免疫組化染色,檢測LECs 中凋亡相關(guān)基因caspase-3 的表達;以及采用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶缺口標記原位細胞檢測法(TUNEL)檢測EGCG 對地塞米松誘發(fā)的兔晶狀體上皮凋亡細胞數(shù)量的影響,并進行相關(guān)比較及統(tǒng)計學分析。 結(jié)果:
3、 1、透明度觀察,各實驗點觀察不同濃度EGCG 處理組晶狀體透明性均低于空白對照組,但高于地塞米松處理組,差異有顯著統(tǒng)計學意義。 2、氧化指標的觀察,和空白對照組比較,地塞米松處理組T-AOC, Na+-K+ATP 與GSH-Px 活性明顯降低,不同濃度EGCG 處理組上述指標有不同程度的改善。 3、免疫組化觀察,地塞米松組晶狀體上皮細胞caspase-3 活化表達顯著上調(diào),EGCG可以明顯減少晶狀體上皮細胞caspas
4、e-3 活化表達,且存在一定程度的劑量依賴性。 4、TUNEL 檢測觀察,地塞米松組LECs 凋亡率顯著高于空白對照組;地塞米松與不同濃度EGCG 處理組比較,有顯著性差異。 結(jié)論: 1、EGCG 具有抗糖皮質(zhì)激素損傷作用,可抑制地塞米松損傷所誘導兔晶狀體上皮細胞調(diào)亡,其作用可能是防止和延緩激素性白內(nèi)障的發(fā)生和發(fā)展的細胞學基礎。 2、激素性白內(nèi)障晶狀體抗氧化酶系統(tǒng)的改變對白內(nèi)障的發(fā)生起重要作用。
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