老齡小鼠對電針刺激預(yù)處理的中樞反應(yīng)性及Wnt通路在其中的作用.pdf

1、心腦血管疾病當(dāng)今已超過癌癥成為導(dǎo)致人類死亡主要原因,尤其是老年人更易遭受腦血管意外從而嚴(yán)重影響其生存質(zhì)量甚至生命。目前對腦卒中或腦血管意外的治療通常應(yīng)用以下方法，如低溫療法、興奮性氨基酸受體阻滯劑等。但是這些措施存在著不同程度的局限性和副作用。因此，對更安全、更具有臨床適用性的預(yù)處理措施的研究是近年來缺血保護研究領(lǐng)域的一大方向。
　　在我國，采用中醫(yī)針灸治療腦卒中已有上千年的歷史。由于其療效顯著，至今仍廣泛應(yīng)用于臨床。電針是將傳統(tǒng)

2、針灸與電流刺激相結(jié)合，進一步提高了治療效果。在我科以前的研究中發(fā)現(xiàn)用電流強度lmA，頻率2/l5Hz的疏密波電針灸大鼠”百會穴”(30min×5d)，能夠?qū)CAO大鼠產(chǎn)生明顯的保護作用。但是對于前腦缺血的動物尚沒有相關(guān)研究。此外，有關(guān)電針刺激預(yù)處理的研究均在青年動物進行，對老齡動物尚未有研究，而老齡患者是缺血損害發(fā)生的高危群體。因此，本研究利用老齡小鼠前腦缺血模型(BCCAO)觀察了電針刺激預(yù)處理的腦保護作用，對其機制進行了探討。

3、r>　　此外，對預(yù)處理的研究已有多年，而在臨床能得到應(yīng)用的預(yù)處理措施還很有限。電針刺激實施簡便，安全性高；而舒芬太尼是臨床上得到廣泛應(yīng)用的阿片類藥物，二者若能作為預(yù)處理措施將具有較好的應(yīng)用前景。因此，本研究還觀察了舒芬太尼預(yù)先給藥的腦保護作用，并對電針刺激預(yù)處理的臨床應(yīng)用進行了初步觀察。
　　實驗一電針刺激預(yù)處理對老齡小鼠前腦缺血再灌注損傷的保護效應(yīng)
　　目的：探討電針刺激預(yù)處理是否對老齡小鼠前腦缺血具有保護效應(yīng)。
　

4、　方法：雄性18月齡C57BL6小鼠20只，隨機分為2組（n=10）：對照組（Control組），行單純?nèi)毖俟嘧?，即阻閉雙側(cè)頸總動脈20min后進行再灌注；電針組接受電針刺激預(yù)處理百會穴30min，連續(xù)5d，最后一次預(yù)處理后24h接受BCCAO20min。再灌注24h后對所有動物進行神經(jīng)功能評分并取腦行HE染色。
　　結(jié)果：再灌注24h，電針刺激預(yù)處理組動物神經(jīng)功能評分顯著優(yōu)于對照組（P<0.05），電針刺激預(yù)處理組動物海馬CA

5、1區(qū)壞死神經(jīng)元數(shù)量明顯少于對照組（P<0.05）。
　　結(jié)論：電針刺激預(yù)處理對老齡小鼠前腦缺血再灌注損傷具有保護作用。
　　實驗二電針刺激預(yù)處理后老齡小鼠腦內(nèi)Wnt信號通路的改變
　　目的：探討Wnt通路在老齡小鼠電針刺激預(yù)處理腦保護中的作用。
　　方法：清潔級18月齡雄性C57BL6小鼠20只，隨機分為2組（n=10）：對照組（Control組），行單純?nèi)毖俟嘧?，即阻閉雙側(cè)頸總動脈20min后進行再灌注；電針

6、組接受電針刺激預(yù)處理百會穴30min，連續(xù)5d，最后一次預(yù)處理后24h接受BCCAO20min。再灌注24h后，取海馬和皮層進行Wnt通路功能分類基因芯片分析。
　　結(jié)果：與對照組比較，電針刺激預(yù)處理后老年小鼠皮層中Wnt3、Wnt1、Wnt5a、Fzd4、Fzd8顯著升高，Wnt7a顯著下降；海馬中Wnt7a顯著下降。
　　結(jié)論：Wnt3、Wnt1、Wnt5a、Fzd4、Fzd8、Wnt7a可能參與老年小鼠電針刺激預(yù)處理腦

7、保護的過程。
　　實驗三電針刺激預(yù)處理對顱腦腫瘤切除術(shù)患者的腦保護作用
　　目的：觀察術(shù)前予電針刺激預(yù)處理對顱腦腫瘤切除術(shù)患者血清腦損傷標(biāo)記物S100β和NSE水平的影響。
　　方法：32例患者在全麻下行顱腦腫瘤切除術(shù)，分兩組（n=16）。電針組術(shù)前電針刺激風(fēng)府和風(fēng)池穴30min，2/15Hz，1～4mA，對照組無預(yù)處理。常規(guī)誘導(dǎo)、維持麻醉。通過酶聯(lián)免疫吸附方法測定手術(shù)前、切皮前、腫瘤切除后、手術(shù)結(jié)束時、術(shù)后24h血清

8、S100β和NSE含量。
　　結(jié)果：切皮前兩組患者血清S100β和NSE均無明顯改變，腫瘤切除后血清NSE水平顯著升高而S100β僅有升高而無顯著性差異，手術(shù)結(jié)束時和術(shù)后24h兩組患者血清S100β和NSE均較術(shù)前有顯著升高，手術(shù)結(jié)束時和術(shù)后24hEA組S100β和NSE均顯著低于CTRL組，差異有顯著性意義，P均<0.05；手術(shù)前、腫瘤切除后、手術(shù)結(jié)束時和術(shù)后24hS100β和NSE均呈持續(xù)升高。
　　結(jié)論：術(shù)前電針刺激風(fēng)

9、府和風(fēng)池30min可能降低顱腦腫瘤手術(shù)期間腦損傷標(biāo)記物S100β和NSE升高的程度。
　　實驗四舒芬太尼預(yù)先給藥對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護作用
　　目的：觀察舒芬太尼預(yù)先給藥對大鼠大腦中動脈阻閉（MCAO）所致局灶性腦缺血-再灌注損傷的保護作用。
　　方法：40只雄性大鼠,隨機分為4組（n=10）：三個舒芬太尼處理組和對照組，分別于缺血造模前30min給予腹腔注射舒芬太尼3μg/kg、6μg/kg、9μg/kg

10、或等容積生理鹽水。給藥30min后所有動物用右側(cè)頸內(nèi)動脈尼龍線線栓法致MCAO 120min后恢復(fù)再灌注。再灌注24h后記錄神經(jīng)功能障礙評分。隨后取大腦切片行2,3,5-triphenyltetra-zolium(TTC)染色以計算腦梗死容積百分比。
　　結(jié)果：再灌注后24hNDS評分：3μg/kg組明顯高于6μg/kg、9μg/kg、對照組(P﹤0．05)；梗死容積百分比3μg/kg組明顯低于6μg/kg、9μg/kg、對照組(

11、P﹤0．05)，6μg/kg、9μg/kg、對照組間評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義；梗死容積百分比6μg/kg、9μg/kg、對照組間無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：舒芬太尼3μg/kg預(yù)先給藥可明顯減輕大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷。
　　小結(jié)：
　　1.電針刺激預(yù)處理對老齡小鼠前腦缺血再灌注損傷具有保護效應(yīng)。
　　2.Wnt通路中的Wnt3、Wnt1、Wnt5a、Fzd4、Fzd8、Wnt7a可能參與了電針刺激預(yù)處理腦保護過程。