免疫金納米籠@CK19抗體探針對人乳腺癌細胞株MCF-7靶向光熱治療及毒性的研究.pdf

1、目的:金屬納米顆粒具有光熱轉換效應,可將吸收的光能量轉化為熱能、進而產(chǎn)生高溫殺滅腫瘤細胞?；诮鸺{米顆粒的光熱轉換特性,觀察經(jīng)Anti-CK19抗體鏈接的免疫金納米籠對人乳腺癌細胞MCF-7靶向光熱殺傷效應,通過體外實驗探討其對腫瘤細胞的殺傷作用及其毒性大小,有望為后期動物實驗及臨床應用提供理論基礎。
　　方法:金納米籠經(jīng)Anti-CK19抗體鏈接后制成探針使其具有生物靶向性,通過免疫組化方法檢測MCF-7細胞膜表面是否表達CK1

2、9抗原。將細胞分為兩組;實驗組(A組):將金納米籠-抗體探針鏈接細胞后,用功率密度為1.5 W/cm2、波長為808 nm的激光照射30 min;對照組BⅠ組:使用相同光照強度和波長的激光單純光照30 min而不加入金納米籠-抗體探針;對照組BⅡ組為單純加入金納米籠-抗體探針而無光照;對照組BⅢ組:無金納米籠無光照。觀察實驗組及對照組溫度隨時間變化曲線,通過熒光終止劑染色實驗組和對照組細胞以及運用流式細胞儀檢測免疫金納米籠對人乳腺癌細胞

3、 MCF-7的光熱殺傷作用。通過四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法觀察不同濃度的金納米籠-抗體探針對MCF-7細胞的毒性大小。
　　結果:通過細胞免疫組化證實MCF-7細胞膜表達CK19抗原。A組溫度升高明顯,光照5~6 min后便可從室溫22℃上升至48℃,后達到平衡;BⅠ組溫度無明顯變化,上升至35℃左右則不再變化;BⅡ與BⅢ組溫度無變化。通過熒光終止劑染色細胞以及流式細胞儀檢測實驗組和對照組的細胞,發(fā)現(xiàn)實驗組細胞大量凋亡,而對照

4、組細胞活性基本未受影響(P<0.05)。MMT法結果顯示免疫金納米籠對MCF-7細胞毒性較小(P<0.05)。
　　結論:(1)通過免疫組化染色證實,CK19抗原主要存在人乳腺癌細胞系 MCF-7細胞膜表面;(2)免疫金納米籠對人乳腺癌細胞MCF-7具有靶向殺傷作用,且用功率密度為1.5 W/cm2、波長為808 nm的激光照射30 min后細胞死亡率可達87.9％;(3)濃度為10 mg/ml的免疫金納米籠對MCF-7細胞毒性影