老鼠簕乙醇浸膏抗大鼠肝纖維化作用的研究.pdf

1、目的： 1、從紅樹植物老鼠筋全株制備老鼠筋乙醇浸膏，并測定該浸膏的急性毒性。 2、探討老鼠簕乙醇浸膏對大鼠實驗性肝纖維化的影響。 方法： 1、采用75％乙醇、以乙醇冷浸法制備老鼠簕乙醇浸膏。Bliss法測定其急性毒性，計算出LD50。 2、采用皮下注射40％CCL4植物油溶液和腹腔注射豬血清兩種方法復制中毒性和免疫性兩種肝維化大鼠模型，兩組模型動物均隨機分為模型對照組、秋水仙堿組、老鼠簕乙醇浸膏低

2、劑量組、老鼠筋乙醇浸膏高劑量組4組。另取大鼠不注射CCl4或豬血清作為正常對照組(注射等體積植物油或生理鹽水)。造模第四周后在中毒性肝纖維化模型組隨機抽取大鼠2只，在免疫性肝纖維化模型組中隨機抽取大鼠5只，并取相應正常對照組大鼠，處死取肝臟組織，HE染色做病理檢查，顯微鏡下觀察肝纖維化模型是否已經(jīng)成立，如造模成功則開始給藥治療。各組大鼠分別以生理鹽水、0.4mg/kg秋水仙堿懸液、1g/kg(相當于生藥23.30g/kg)老鼠簕乙醇浸膏

3、溶液，2g/kg(相當于生藥46.60g/kg)老鼠簕乙醇浸膏溶液灌胃，給藥體積均為10m/kg體重，每天一次，給藥時間共四周。 觀察大鼠在造模及給藥治療過程中毛發(fā)，活動等一般情況及體重變化等，給藥治療四周后，采血分離血清，檢測血清中以下指標：(1)肝功能指標：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量。并以TP和ALB值計算出血清中球蛋白(GLB)含量及白蛋白球蛋白比值(A/G

4、)；(2)血清氧化指標：黃嘌呤氧化酶法測定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、TBA法測定血清中丙二醛(MDA)含量；(3)肝纖維化指標：ELISA測定血清層粘蛋白(LN)含量、放射免疫法測定透明質(zhì)酸(HA)的含量。頸椎脫臼處死各組大鼠，取肝臟，稱濕重，計算肝指數(shù)。另取肝臟組織，10％中性甲醛固定，切片，HE染色，顯微鏡下觀察各大鼠肝臟病理形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，并進行病理學評分。 結(jié)果： 1、以28kg老鼠筋生藥制備老鼠簕乙醇

5、浸膏1200g，急性毒性實驗表明其LD50為20.04g浸膏(相當于生藥467.50g/kg)，95％可信限17.66～22.74g浸膏/kg(相當于生藥412.01g/kg～530.53g/kg)。 2、中毒性肝纖維化大鼠造模過程中，大鼠一般狀態(tài)較差，體重增長減緩，造模大鼠均有死亡；第四周末，大鼠已出現(xiàn)肝纖維化改變。與正常對照組大鼠相比，造模大鼠血清中AIT、AST、MDA、HA、LN含量顯著升高，而TP、ALB、SOD值顯著

6、降低(P<0.01)，肝指數(shù)增加(P<0.05)，肝臟病理學評分增加(P<0.01)，經(jīng)秋水仙堿和老鼠簕乙醇浸膏治療后，均有不同程度改善(P<0.05，P<0.01)。 3、免疫性肝纖維化大鼠造模過程中，造模大鼠一般狀態(tài)，體重增長無明顯變化，無大鼠死亡；至第四周末，大鼠己出現(xiàn)肝纖維化改變。與正常對照組大鼠相比，免疫性肝纖維化大鼠血清中MDA、HA、LN含量顯著升高，SOD值顯著降低(P<0.01)，肝臟病理學評分增加(P<0.0