Id1-Id3在子宮內(nèi)膜癌中的表達及對子宮內(nèi)膜癌細胞生物學的作用.pdf

1、南方醫(yī)科大學2010級碩士學位論文Idl／Id3在子宮內(nèi)膜癌中的表達及對子宮內(nèi)膜癌細胞生物學的作用TheexpressionofIdl／Id3inendometrialcarcinomaandroleofIdl／Id3inbiologicalfunctionofendometrialcarcinomacell課題來源：廣東省自然科學基金No$2012010009351廣東省科技計劃項目No20078031001001學位申請導師姓專業(yè)名

2、培養(yǎng)類培養(yǎng)層所在學人刊、麗麗名劉國炳主任醫(yī)師副教授稱婦產(chǎn)科型專業(yè)學位次碩士院南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院2013年3月20日廣州摘要胞增殖或趨化相關(guān)信號轉(zhuǎn)導通路，研究子宮內(nèi)膜癌細胞的浸潤、增生及轉(zhuǎn)移的機制。重點探討雙敲低Idl／Id3基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜癌細胞增殖能力、侵襲能力、遷移能力及粘附能力的影響，闡明Idl；ld3基因在子宮內(nèi)膜癌生長轉(zhuǎn)移中的生物學作用，檢驗干擾Idl／Id3是否可以有效治療子宮內(nèi)膜癌，為臨床診斷和治療提供理論依據(jù)。【研究方法

3、】1Westemblot檢測Idl、Id3在子宮內(nèi)膜癌組織內(nèi)表達：將隨機挑選的南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院婦產(chǎn)科2011年6月2011年10月住院手術(shù)的4例子宮內(nèi)膜癌患者新鮮組織及相應的癌旁組織提取全蛋白，根據(jù)BCA蛋白定量試劑盒進行定量，測定其在562nm處的吸收值(A562)。計算各濃度蛋白標準的平均吸光度，繪制標準曲線，計算回歸方程。提取的總蛋白，加入2xSDS蛋白上樣緩沖液(按1：1比例)，100℃煮沸5min，20。C保存?zhèn)溆?。Wes

4、ternblot方法檢測后觀察凝膠圖像，應用AdobePhotoshop圖像軟件掃描Westernblot凝膠圖片，得到相應灰度值，觀察4例子宮內(nèi)膜癌組織及相應的癌旁組織中的Idl／Id3的表達。2qRTPCR檢測不同腺病毒載體感染子宮內(nèi)膜癌HEC1B和RL952細胞株后Idl、Id3、MMP2、CXCR4、P21mRNA水平：實驗將兩株細胞各分為未處理細胞組(簡寫contr01)、空白病毒組(vector)、啟動子病毒組(promot

5、er)、Idl／Id3雙敲低組(RNAi)。對四組細胞進行提取RNA、去基因組、純度檢測和電泳檢測、逆轉(zhuǎn)錄及定量PCR操作。采用△△CT法對熒光定量PCR結(jié)果進行定量分析，計算Idl／Id3雙敲低后MM2、CXCR4、P21的表達抑制率。3Westernblot檢測不同腺病毒載體感染子宮內(nèi)膜癌HEC1B和RL952細胞株后Idl、Id3、MMP2、CXCR4、P21蛋白表達量：對每株細胞的各四組細胞提取全蛋白，具體步驟同前。4噻唑藍(M