生物融合蛋白CTB-LK在向日葵中的表達研究.pdf

1、血栓性疾病是一種常見的心腦血管病，嚴(yán)重危害著人類的健康和生命。蚓激酶能溶解血栓，降低血液粘稠度，抑制血小板聚集，降低纖維蛋白原及改善微循環(huán)，具有很好的體內(nèi)外溶栓抗凝作用，在臨床上顯示對多種心血管疾病具有良好療效。 本研究嘗試?yán)弥参锷锓磻?yīng)器--向日葵表達生物融合蛋白CTB-LK。首先，將具有良好的免疫佐劑和輸送載體功能的CTB的基因ctb與蚓激酶LK的基因腩連接，隨后構(gòu)建植物雙元表達載體pX6-ctb-lk腩，通過電擊法將載體

2、質(zhì)粒導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌（Agrobacterium tumefaciens）菌株C58獲得了工程菌。通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化向日葵，經(jīng)篩選，最終獲得了4株具有卡那霉素抗性的向日葵再生植株，其中2株已經(jīng)獲得了向日葵種子。用CTAB法提取向日葵基因組DNA做PCR特異擴增，檢測出3株是陽性的，這初步表明ctb-lk基因已經(jīng)成功導(dǎo)入向日葵的細胞中。提取轉(zhuǎn)基因植株的總RNA做RT-PCR，結(jié)果顯示向日葵植株擴增出特異性目的片段，證明ctb-lk基因已成