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文檔簡介
1、目的:通過滋陰填髓益腦法對(duì)局灶性腦缺血大鼠行為、腦組織形態(tài)學(xué)和神經(jīng)生化標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究,揭示滋陰填髓益腦法對(duì)大鼠局灶性腦缺血—再灌注的作用及其機(jī)理。
方法:1.選用雄性Sprague-Dawley大鼠,SPF級(jí),體重250g-280g,按隨機(jī)化原則,分為5組,分別為假手術(shù)組、模型組、滋陰填髓益腦方組、補(bǔ)陽還五湯組、尼莫地平組,每組15只。假手術(shù)組做動(dòng)脈分離手術(shù),不栓塞大腦中動(dòng)脈。模型組,滋陰填髓益腦方組,補(bǔ)陽還五湯組,尼莫
2、地平組均行大腦中動(dòng)脈栓塞術(shù)。滋陰填髓益腦方、補(bǔ)陽還五湯、尼莫地平分別按照每日70kg成人121g、80g、90mg藥量計(jì)算。大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞術(shù)后24小時(shí)開始灌胃對(duì)應(yīng)組藥物,連續(xù)灌胃7天,每日一次,給藥量分別為滋陰填髓益腦方10.8g/kg,補(bǔ)陽還五湯7.15g/kg,尼莫地平8.0mg/kg(均以生藥量計(jì)算),假手術(shù)組和造模組分別以等量生理鹽水10ml/kg灌胃。最后一次給藥后30min斷頭取腦。
2.結(jié)果觀察,1)腦梗
3、死體積的測(cè)定;2)組織病理學(xué)觀察;3)血清T-SOD及Cu-Zn-SOD測(cè)定;4)血清丙二醛(MDA);5)Bcl-2、Bax免疫組化染色;6)神經(jīng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(TUNEL法)。
結(jié)果:1:顯示滋陰填髓益腦方,補(bǔ)陽還五湯,尼莫地平均有減小梗死體積的作用,但尼莫地平該作用弱于滋陰填髓益腦方與補(bǔ)陽還五湯。2:腦組織病理學(xué)檢查:滋陰填髓益腦方,補(bǔ)陽還五湯組明顯優(yōu)于模型組;3:滋陰填髓益腦方組明顯增加T-SOD活性,降低MDA含量
4、;4:對(duì)損傷后腦組織Bcl-2、Bax表達(dá)影響:滋陰填髓益腦方組、補(bǔ)陽還五湯組、尼莫地平組Bcl-2表達(dá)上升明顯,Bax表達(dá)下降,Bax/Bcl-2明顯低于缺血再灌組(P均<0.01)。其中滋陰填髓益腦方組Bax/Bcl-2下降較補(bǔ)陽還五湯組、尼莫地平組更為明顯(p<0.01)。5:與模型組相比,填髓益腦方組、補(bǔ)陽還五湯組、尼莫地平組大鼠缺血側(cè)腦組織凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目顯著減少(P<0.01),三組間凋亡細(xì)胞數(shù)目無顯著性差異(P>0.05)
5、。
結(jié)論:通過本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)顯示滋陰填髓益腦方能夠有效地減少缺血再灌注后的腦梗死面積,改善梗死區(qū)腦組織修復(fù),滋陰填髓益腦方可提高模型動(dòng)物血清SOD、Cu-Zn-SOD活性,表明滋陰填髓益腦方對(duì)腦組織細(xì)胞脂質(zhì)過氧化損傷有顯著保護(hù)作用,滋陰填髓益腦方可明顯促進(jìn)缺血皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞Bcl-2的表達(dá),同時(shí)也有抑制Bax表達(dá)的作用,即對(duì)Bax/Bcl-2有調(diào)低作用,因此可以推測(cè)滋陰填髓益腦法可以抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡從而起到神經(jīng)保護(hù)作用,而這種抗
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