乳化異氟烷預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:探討8％乳化異氟烷預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　 方法:雄性Sprague-Dawley大鼠32只,250g-280g,隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、乳化異氟烷組、脂肪乳組,每組8只。采用大腦中動脈線栓法阻斷前腦血供2 h、再灌注24 h制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。大鼠用10％水合氯醛麻醉,取頸正中切口,暴露右側(cè)頸總動脈、頸外動脈及頸內(nèi)動脈,結(jié)扎頸總動脈、頸外動脈,于頸總動脈分叉下方剪一

2、切口,插入一預(yù)先用石蠟包裹線端成圓頭的尼龍魚線,直徑約0.26 mm,置入頸內(nèi)動脈18mm～20mm,至有阻力不能再進(jìn)為止。阻閉2h后抽出魚線,恢復(fù)再灌注。術(shù)中自主呼吸,并用烤燈維持肛溫37℃～37.5℃。假手術(shù)組僅分離血管,不留置線栓。缺血再灌注組、乳化異氟烷組和脂肪乳組分別給予0.9％生理鹽水、8％乳化異氟烷、30％脂肪乳腹腔注射7.5ml·kg-1,24 h后按上述方法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。所有大鼠再灌注24 h后用Ze

3、a Longa評分法進(jìn)行神經(jīng)功能缺陷評分。評分完成后處死大鼠取腦用TTC染色法測腦梗死體積。另取雄性Sprague-Dawley大鼠24只,250g-280g,隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、乳化異氟烷組、脂肪乳組,每組6只。于腦缺血2 h,再灌注24 h后,行TUNEL陽性細(xì)胞(凋亡神經(jīng)細(xì)胞)的檢測及Bcl-2,Bax,caspase3,cytochrome c免疫組織化學(xué)染色。
　　 結(jié)果:1)假手術(shù)組大鼠無明顯的神經(jīng)功能損

4、害,與假手術(shù)組比較,其他組大鼠均出現(xiàn)不同程度神經(jīng)功能損害。乳化異氟烷組神經(jīng)功能損傷程度輕于缺血再灌注組和脂肪乳組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2)假手術(shù)組未發(fā)現(xiàn)有腦梗死病灶,其余組腦缺血再灌注后可見白色梗死區(qū)主要集中在額頂區(qū)皮質(zhì)及紋狀體。與乳化異氟烷組相比,缺血再灌注組、脂肪乳組腦梗死體積百分比增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。3)TUNEL染色結(jié)果表明,與假手術(shù)組比較,缺血再灌注組、脂肪乳組及乳化異氟烷組凋亡細(xì)胞陽性率均增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。與乳化異氟

5、烷組比較,缺血再灌注組、脂肪乳組凋亡細(xì)胞陽性率增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。4)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較,缺血再灌注組、脂肪乳組及乳化異氟烷組Bcl-2,Bax,cytochrome c,caspase3蛋白表達(dá)均增加。與乳化異氟烷組比較,缺血再灌注組、脂肪乳組:Bcl-2蛋白表達(dá)降低,Bax,cytochrome c,caspase3蛋白表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論:乳化異氟烷預(yù)處理能明顯減輕大鼠局灶性腦