乳化異氟烷預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷及GluR6-PSD95-MLK3活性的影響.pdf

1、目的：觀察乳化異氟烷(emulsified isoflurane，EI)預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響；檢測(cè)谷氨酸受體6-突觸后致密物質(zhì)95-混合譜系激酶3活性的變化，探討EI發(fā)揮作用的具體機(jī)制。
　　方法：第一部分：采用大腦中動(dòng)脈線栓法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。64只SD成年雄性大鼠隨機(jī)分為8組(n=8)：假手術(shù)組(SHAM組)、缺血2h再灌注1h組(1h組)、缺血2h再灌注2h組(2h組)、缺血2h再灌注4h組

2、(4h組)、缺血2h再灌注6h組(6h組)、缺血2h再灌注8h組(8h組)、缺血2h再灌注12h組(12h組)、缺血2h再灌注24h組(24h組)，SHAM組只分離血管，不留置線栓，將其余大鼠分別于缺血2h再灌注1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h時(shí)行神經(jīng)缺陷評(píng)分(Neurologic Deficit Score，NDS)后，迅速斷頭冰上取腦，分別留取缺血側(cè)海馬和皮層。應(yīng)用Western bolt定量檢測(cè)各組中大鼠缺血側(cè)海馬和皮

3、層中谷氨酸受體6(Glutamate Receptor6，GluR6)、突觸后致密物質(zhì)95(Postsynaptic dense material95，PSD95)及混合譜系激酶3(Mixed Lineage Kinases3，MLK3)的表達(dá)。選出第一部分實(shí)驗(yàn)中GluR6、PSD95和MLK3表達(dá)峰值的時(shí)間點(diǎn)(缺血2h再灌注x h)做第二部分實(shí)驗(yàn)。
　　第二部分：另取96只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組(n=24)：假手術(shù)組(SH

4、AM組)，腹腔注射NS10.5 ml/kg，24h后只分離血管，不置入線栓；缺血再灌注組(I/R組)，腹腔注射NS10.5ml/kg，24h后制備模型，乳化異氟烷組(EI組)，腹腔注射8％EI10.5ml/kg，24h后制備模型；脂肪乳(Lipid Emulsion，LE)組(LE組)，腹腔注射30％脂肪乳10.5ml/mg，24h后制備模型。缺血2h再灌注x h時(shí)行神經(jīng)功能缺陷評(píng)分后取腦，2，3，5-氯化三苯基四氮唑(2，3，5-Tr

5、iphenyltetrazolium Chlorid，TTC)染色觀察并計(jì)算腦梗死體積百分比，觀察各組14天生存率，Western bolt定量測(cè)定缺血側(cè)海馬及皮層GluR6、PSD95及MLK3含量的變化。
　　結(jié)果：第一部分：與SHAM組比較，其余各組大鼠海馬及皮層中GluR6、PSD95及MLK3表達(dá)均有所增加。且缺血2h再灌注6h時(shí)海馬及皮層中GluR6、PSD95及MLK3表達(dá)達(dá)高峰。
　　第二部分：SHAM組大鼠

6、無(wú)明顯神經(jīng)功能損害和腦梗死體積，其他組大鼠均出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)功能損害和腦梗死。與SHAM組比較，I/R組NDS和腦梗死體積百分比顯著增高，GluR6、PSD95和MLK3表達(dá)均增加，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與I/R組比較，EI組NDS和腦梗死體積百分比顯著降低，生存率明顯增高，GluR6、PSD95和MLK3表達(dá)均降低(P<0.01)；LE組NDS和腦梗死體積百分比無(wú)明顯變化，GluR6、PSD95和MLK3表達(dá)無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意