非小細(xì)胞肺癌患者TUBB3 mRNA、microRNA-125a-5p、let-7e的表達及其與臨床病理特征的關(guān)系.pdf

1、研究背景及目的:
　　 肺癌是世界上發(fā)病率最高的惡性腫瘤，也是死亡人數(shù)最多的惡性腫瘤，其中85％是非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)。以往研究表明，在多種實體腫瘤中TUBB3蛋白高表達與惡性腫瘤對抗微管類化療藥物的耐藥有關(guān)，此外，多項研究表明microRNAs(miRNAs)與多種人類腫瘤的發(fā)生、侵襲及凋亡有著密切的聯(lián)系。本實驗旨在研究Ⅲ型β微管蛋白(classⅢβ-tubulin，

2、TUBB3)mRNA及miR-125a-5p、let-7e、miR-30a、miR-30e、miR-30e*在NSCLC患者腫瘤組織及正常肺組織中的表達情況，并將其與臨床病理特征及預(yù)后情況相比較，探討TUBB3mRNA及miR-125a-5p、let-7e、miR-30a、miR-30e、miR-30e*的表達與NSCLC患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，為研究非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病機制提供新的理論學(xué)說和實驗依據(jù)。
　　 方法:

3、　　 選取NSCLC患者手術(shù)切除的新鮮腫瘤組織標(biāo)本及相應(yīng)正常肺組織標(biāo)本86例，應(yīng)用SYBR-GREEN逆轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR法檢測腫瘤組織及相應(yīng)正常肺組織中TUBB3 mRNA表達情況。另應(yīng)用Taqman莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR法檢測70例NSCLC患者腫瘤組織及正常肺組織中miR-30a，miR-30e*，miR-125a-5p，let-7e，miR-30e表達情況。統(tǒng)計學(xué)分析上述各分子與臨床病理特征如年齡、性別、吸煙史、病理類型

4、、分化程度、侵犯臟層胸膜、腫瘤大小、臨床TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及總生存時間的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.TUBB3 mRNA在非小細(xì)胞肺癌中的表達；
　　 TUBB3 mRNA在86例NSCLC患者腫瘤組織表達明顯高于正常肺組織，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　 2.TUBB3 mRNA表達與非小細(xì)胞肺癌患者臨床病理特征的關(guān)系；
　　 TUBB3 mRNA表達與非小細(xì)胞肺癌患

5、者病理類型有關(guān)（P＜0.05），肺腺癌TUBB3mRNA表達較肺鱗癌高。（P＜0.05）。
　　 3.TUBB3 mRNA表達與非小細(xì)胞肺癌患者總生存時間(OS)的關(guān)系；
　　 TUBB3 mRNA表達情況與非小細(xì)胞肺癌患者術(shù)后總生存時間之間無明顯相關(guān)性（P＞0.05），COX回歸分析亦顯示TUBB3 mRNA表達不是導(dǎo)致非小細(xì)胞肺癌患者死亡的危險因素（P＞0.05），但低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臟層胸膜侵犯情況是導(dǎo)致非小細(xì)胞

6、肺癌患者死亡的危險因素（P＜.05）。
　　 4.MiRNAs在非小細(xì)胞肺癌中的表達；
　　 miR-125a-5p、let-7e、miR-30a、miR-30e在70例NSCLC腫瘤組織中的表達明顯低于正常組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），miRNA-30e*在腫瘤組織與正常組織中的表達差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 5.MiRNAs表達與非小細(xì)胞肺癌患者臨床病理特征的關(guān)系；
　　

7、miR-125a-5p、let-7e、miR-30e在分化程度為低分化的非小細(xì)胞肺癌患者表達較中高分化患者低(P＜0.05）;let-7e在肺鱗癌中表達較肺腺癌低（P＜0.05）;miR-30e*表達與非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤＞3cm、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期為中晚期有關(guān)（P＜0.05），miRNA-30e*的降低預(yù)示較差的臨床分期。
　　 6.MiRNAs表達與非小細(xì)胞肺癌患者總生存時間(OS)的關(guān)系；
　　 miRNA-

8、125a-5p和let-7e表達情況與非小細(xì)胞肺癌患者的術(shù)后總生存時間之間有明顯相關(guān)性（P＜0.05），單因素COX回歸分析顯示miRNA-125a-5p和let-7e的表達都是影響非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的因素（P＜0.05），而多因素COX回歸分析顯示let-7e是預(yù)測非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的獨立因素（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1.TUBB3 mRNA在非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤組織中表達較相應(yīng)正常肺組織高，miR-

9、125a-5p、let-7e、miR-30a、miR-30e在非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤組織中表達較相應(yīng)正常肺組織低;
　　 2.TUBB3 mRNA在肺腺癌中表達較肺鱗癌高;
　　 3.TUBB3 mRNA表達水平與非小細(xì)胞肺癌患者的術(shù)后總生存時間之間無明顯關(guān)系;
　　 4.miR-125a-5p、let-7e、miR-30e表達降低與非小細(xì)胞肺癌分化程度為低分化有關(guān);
　　 5.miR-125a-5p、le