楮頭紅保肝降酶活性成分研究.pdf

1、楮頭紅( Sarcopyramis nepalensis Wall.),又名尼泊爾肉穗草、風(fēng)鼓斗草(風(fēng)柜斗草),屬于野牡丹科(Melastomaceae)中的肉穗草屬(Sarcopyramis Wall1)。主要分布于東南亞和我國的四川、云南、湖北、廣西、廣東、江西、臺(tái)灣、福建等地。據(jù)《中藥大詞典》記載:楮頭紅全草可藥用,具有清熱解毒、清肝瀉火之效,是治療急性肝炎、肺熱咳嗽、蛇頭疔、無名腫毒、胃腸炎等疾病的珍稀名貴中草藥。對(duì)急性肝炎(甲

2、肝、乙肝急性期)療效最佳,對(duì)慢性肝炎及乙肝病毒攜帶者有效,在福建、湖北等民間廣為使用,是一種極有價(jià)值的天然藥用植物和中草藥資源。對(duì)該植物的化學(xué)成分、藥理活性、藥效關(guān)系等的研究目前尚未見系統(tǒng)報(bào)道。為了解其含有的主要化學(xué)成分及保肝降酶物質(zhì)基礎(chǔ),本課題組開展了如下實(shí)驗(yàn)研究,以期為臨床用藥提供科學(xué)依據(jù)。
　　一、楮頭紅化學(xué)成分研究
　　本課題以楮頭紅為研究對(duì)象,采用正、反相硅膠柱層析、凝膠等各種分離方法,從其乙醇提取物的石油醚部位、

3、乙酸乙酯部位和正丁醇部位中共分離出12個(gè)化合物,分別為5,7,3’-三羥基-8-(α-甲基-3’’,4’’,5’’-三羥基芐基)-4’-甲氧基黃酮(1)、(E)-1-(3,4-二羥基苯基)丙烯酸乙酯(2)、硬脂酸(3)、軟脂酸(4)、對(duì)羥基苯甲酸(5)、3,4-二羥基苯甲酸(6)、龍膽酸(7)、沒食子酸(8)、β-谷甾醇(9)、胡蘿卜苷(10)、豆甾醇硬脂酸酯(11),其中化合物1為一個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的具有8-α-甲基芐基的黃酮,很可能是由雙

4、黃酮降解得到的人工產(chǎn)物,該化合物目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道,其他化合物均為首次從該植物中獲得,見表Ⅰ。
　　二、楮頭紅保肝降酶活性研究
　　1.楮頭紅不同極性部位保肝降酶活性篩選
　　取雄性小鼠80只,隨機(jī)分成正常對(duì)照組,病理模型對(duì)照,水飛薊素組,石油醚部位給藥組,乙酸乙酯部位給藥組,正丁醇部位給藥組,水部位給藥組,總膏給藥組共8組。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組每天灌胃給予同等體積0.5％吐溫-80溶液;水飛薊素組每天灌胃給予200

5、mg/kg/d水飛薊素,其余組給藥劑量折算為生藥材均為10g/kg小鼠體重連續(xù)給藥10天,第10天給藥1小后,正常對(duì)照組腹腔注射同等體積大豆油,其他組均腹腔注射0.2%CCl4油溶液。
　　分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組血清ALT、AST高出正常組10到50倍左右,雖然各部位給藥組的血清ALT、AST均有所下降,但超出正常水平較多,在臨床上并無治療意義。綜合文獻(xiàn)值和本實(shí)驗(yàn)室條件,原因可能為造模時(shí)腹腔注射0.2%CCl4油溶液濃度太高,為了

6、更好地觀察藥物的保肝作用,宜將CCl4濃度降為0.1%;結(jié)果初步顯示在同等生藥劑量條件下,總膏和正丁醇部位有一定對(duì)抗CCl4所致急性肝損傷的作用。但其他各部位也都有一定降酶作用,原因可能為總膏萃取過程中存在嚴(yán)重乳化現(xiàn)象,造成部位內(nèi)成分重疊,分散了有效成分。因此,下一步實(shí)驗(yàn)決定只檢測(cè)總膏的活性,不再考察各部位降酶活性。
　　2.楮頭紅醇提物對(duì)四氯化碳所致小鼠肝損傷的保護(hù)作用
　　以腹腔注射0.1%CCl4油溶液造模,考察按生藥

7、材劑量為10g/kg、30g/kg兩個(gè)劑量的總膏對(duì)肝損傷小鼠的ATS、ALT、SOD、MDA、GSH等指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示楮頭紅醇提物低、高劑量組ALT、AST活性均明顯低于模型組,差異有顯著性意義(P<0.05,P<0.01);楮頭紅醇提物低、高劑量明顯升高對(duì)四氯化碳所致肝損傷小鼠的T-SOD活力和GSH含量,降低MDA的含量,其差異有顯著性意義(P<0.05);病理組織學(xué)檢查顯示楮頭紅醇提物低、高劑量肝細(xì)胞腫脹、壞死和炎癥細(xì)胞浸潤程

8、度明顯輕于模型組。
　　3.楮頭紅醇提物對(duì)D-半乳糖胺所致小鼠肝損傷的保護(hù)作用
　　以腹腔注射500mg/kg D-半乳糖胺造模,考察按生藥材劑量為10g/kg、30g/kg兩個(gè)劑量的總膏對(duì)肝損傷小鼠的ATS、ALT、SOD、MDA、GSH等指標(biāo)的影響。楮頭紅醇提物低、高劑量組ALT、AST活性均明顯低于模型組,差異有顯著性意義(P<0.05),楮頭紅醇提物低、高劑量組ALT、AST活性呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系;楮頭紅醇提物低、高

9、劑量明顯升高對(duì)D-半乳糖胺所致肝損傷小鼠的T-SOD活力和GSH含量,降低 MDA的含量;病理組織學(xué)檢查顯示楮頭紅醇提物低、高劑量肝細(xì)胞腫脹、壞死和炎癥細(xì)胞浸潤程度明顯輕于模型組。
　　綜上,通過對(duì)楮頭紅較為系統(tǒng)的化學(xué)成分研究,發(fā)現(xiàn)該藥材中含較多的酚酸類成分以及罕見的8-α-甲基芐基的黃酮化合物,為進(jìn)一步有針對(duì)性的分離該植物中中等極性部位物質(zhì)提供指導(dǎo)信息,減少了系統(tǒng)分離的盲目性;通過CCl4和D-GalN兩個(gè)化學(xué)性肝損傷模型考察楮