小麥與白粉菌互作中與親和性相關(guān)的基因研究.pdf

1、由專性寄生菌Blumeria graminis。f.sp.tritici引起的小麥白粉病是小麥最嚴(yán)重的病害之一。為了研究植物與活體寄生菌親和性反應(yīng)機(jī)理，我們以小麥-白粉菌為體系，研究了小麥對(duì)白粉菌的親和性因子。 小麥品種揚(yáng)158接種白粉菌菌株Qiul后，表現(xiàn)過敏性壞死反應(yīng)(HR)，接種菌株Bai3后表現(xiàn)親和性感病反應(yīng)(S)。本研究以揚(yáng)158接種菌株Bai3和Qiul 5d的小麥葉片及未接種葉片為對(duì)照，采用cDNA-AFLP方法分

2、離篩選與小麥感病性相關(guān)基因，在接種、Bai3 5d后的感病葉片共篩選得到223個(gè)差異性表達(dá)片段，其中有75％可重新擴(kuò)增，對(duì)85個(gè)片段進(jìn)行了測(cè)序分析，有41個(gè)片段與已知序列具有同源性。在這41個(gè)片段中，有26個(gè)片段的同源性較高(E>le-03)。對(duì)編碼葉綠體假設(shè)蛋白、開花協(xié)調(diào)子蛋白、乙烯蛋白激酶抑制子、Clone wlm96.pk028.k4：fis，full insertmRNA、ROP6蛋白、糖基轉(zhuǎn)移酶家族蛋白1、肌醇六磷酸酶、葉綠體

3、核糖體蛋白、延伸因子1gamma-like蛋白、Triticum aestivum，mRNA、Gigantea 3和Patatin-like蛋白等12個(gè)感興趣基因進(jìn)行了RT-PCR分析。結(jié)果表明，編碼開花協(xié)調(diào)子蛋白和肌醇六磷酸酶的基因與小麥對(duì)白粉菌的親和性的關(guān)系不大，而其它10個(gè)基因片段均為差異性表達(dá)。編碼乙烯蛋白激酶抑制子和Clone wlm96.pk028.k4：fis，full insert mRNA的基因僅在抗病和感病葉片中表達(dá)

4、，并在感病葉片接種5d時(shí)表達(dá)最顯著。編碼ROP6蛋白、延伸因子1 gamma-like蛋白、Triticum aestivum，mRNA、Gigantea 3和patatin-like蛋白的基因僅在感病葉片中表達(dá)，其中編碼ROP6蛋白、延伸因子1gamma-like蛋白和Patatin-like蛋白的基因在感病葉片接種1d，2d，5d和7d時(shí)均表達(dá)，且表達(dá)量在第5d達(dá)到峰值。編碼Gigantea 3的基因在感病葉片接種5d和7d時(shí)表達(dá)，

5、且在第5d表達(dá)要顯著一些。編碼mRNA的基因僅在感病葉片接種5d時(shí)表達(dá)。這5個(gè)僅在感病葉片中表達(dá)的基因可能與小麥對(duì)白粉菌的親和性相關(guān)。對(duì)編碼乙烯蛋白激酶抑制子、Clone wlm96.pk028.k4：fis，full insert mRNA、編碼ROP6蛋白、Triticum aestivum，mRNA、Gigantea 3和Patatin-like蛋白等6個(gè)感興趣基因進(jìn)行了Northern雜交驗(yàn)證，結(jié)果與RT-PCR基本一致。本研究