超聲波法與酶水解法結(jié)合分離鵝血血球蛋白工藝的研究.pdf

1、鵝血資源豐富，是寶貴的動(dòng)物蛋白資源，鵝血的蛋白含量高達(dá)23％～28％。其中的血球蛋白，轉(zhuǎn)鐵蛋白,免疫球蛋白等都是具有生物活性功能的蛋白，血細(xì)胞的蛋白含量高達(dá)45％，主要由血紅蛋白構(gòu)成，含量占血細(xì)胞蛋白總量的90％以上，是血液中蛋白的主要聚集所在。然而，由于鵝血中的腥味和血紅色素，限制了對(duì)鵝血資源的利用，深入研究十分匱乏，綜合利用也因此受劍限制。 對(duì)家禽類動(dòng)物血脫色除腥，要結(jié)合高效的細(xì)胞破碎法和脫色方法，在脫色的同時(shí)提高生產(chǎn)效果，

2、減少蛋白損失率。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)動(dòng)物血破碎溶血的方法有：酶溶法、化學(xué)滲透法、溶脹法、機(jī)械破碎法等，但這些方法有的成本高，有的存在化學(xué)試劑殘留，有的耗時(shí)長(zhǎng)、生產(chǎn)效率不高：脫色的方法主要有：氧化法、機(jī)械法、高分子化合物絮凝法、有機(jī)溶劑法，但有的脫色效果不理想，有的生產(chǎn)成本高，有的有機(jī)溶劑殘留難以分離，不利于動(dòng)物血的脫色。 本文比較了細(xì)胞破碎的各種方法和脫色處理的各種方法，綜合分析。選擇超聲波細(xì)胞破碎法與蛋白酶水解法相結(jié)合的方式對(duì)鵝血蛋白

3、進(jìn)行脫色的工藝。相比之下，這兩種方法的組合具有溶血高效徹底、蛋白得率高、脫色效果好、成本低、副反應(yīng)少、無(wú)化學(xué)殘留、易于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)、產(chǎn)品利于吸收等特點(diǎn)。 主要研究結(jié)論如下： 1.脫色加工工藝流程為：新鮮抗凝鵝血→離心→沉淀→細(xì)胞破碎溶血→酶水解→調(diào)節(jié)pH沉淀血紅素→離心→上層清液→活性炭吸附脫色→離心→水解蛋白液。 2.確定了鵝血血細(xì)胞超聲波破碎溶血的工藝：在溫度50℃下，將離心的新鮮鵝血細(xì)胞按溶劑比V紅(蚰

4、)：V生理鹽=5：1加入生理鹽水后在超聲波功率250W下處理15min。 3.鵝血蛋白酶解的條件為：溶血結(jié)束后，將破碎后的溶血液中加入去離子水，調(diào)節(jié)底物濃度為40％，在溫度55℃下．調(diào)整溶液pH8.0，加入木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解．酶比底物濃度[E]/[S]=8000u/g．酶解3h，反應(yīng)過(guò)程中通過(guò)滴加5mol/L的NaOH和HCl溶液來(lái)維持pH值恒定． 4.脫色工藝的確定：酶解結(jié)束后，立即用5mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)水解液