酶法水解紫蘇蛋白制備鮮味肽及分離提純的研究.pdf

1、紫蘇餅粕是紫蘇籽脫油后的副產(chǎn)品，具有氣味芳香，適口性好，蛋白質(zhì)含量高，雜質(zhì)少等特點(diǎn)，是一種非常好的植物蛋白資源。目前，紫蘇餅粕大多數(shù)被當(dāng)作飼料和肥料，未能得到充分利用，不僅造成了蛋白質(zhì)資源的大量浪費(fèi)，還在一定程度上污染了環(huán)境。因此，有效開發(fā)紫蘇蛋白資源十分必要。對(duì)紫蘇籽蛋白酶解得到的紫蘇肽進(jìn)行性質(zhì)、呈鮮味效果、成分的全面研究，有利于天然鮮味劑的研究與開發(fā)，具有一定的應(yīng)用價(jià)值。
　　本課題的研究包括四個(gè)部分:
　　(1)實(shí)驗(yàn)以

2、紫蘇蛋白為原料，采用微波技術(shù)對(duì)紫蘇籽蛋白進(jìn)行分步酶解。經(jīng)過單因素試驗(yàn)和L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果共同分析下得知，第一步胰蛋白酶最佳酶解條件為底物濃度2％、酶添加量1100u/g、 pH8.0、微波溫度50℃、微波反應(yīng)時(shí)間30min，此時(shí)水解度為16.55％。第二步風(fēng)味蛋白酶的最佳酶解條件為微波反應(yīng)時(shí)間30min、微波溫度60℃、酶添加量800u/g、 pH6.5，分步酶解最終水解度為24.59％，相比采用單一胰蛋白酶，水解度提高了48.5

3、8％。結(jié)合RP-HPLC表征，證明了微波輔助分步酶解相比于單酶水解是一種快速且有效的方法。
　　(2)利用SephadexG-15凝膠層析分離純化分步酶解產(chǎn)物，在樣品濃度為20mg/mL,上樣量1mL，流速05mL/min，檢測波長為220nm，超純水洗脫條件下，得到四種不同分子量組成的紫蘇肽組分。結(jié)合RP-HPLC表征，證明了凝膠層析可以較好地將水解液中的混合肽段篩分開來，并得到不同分子量范圍的肽段在最終的酶水解液中的分布情況，

4、且各組分之間存在較大差異，分離效果明顯。
　　(3)利用Q-TOF LC/MS對(duì)蛋白水解液和凝膠層析得到的四種不同分子量段紫蘇肽進(jìn)行成分結(jié)構(gòu)鑒定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果得知第四組分得到的產(chǎn)物中含有最大量的呈鮮味的肽段，綜合分析評(píng)價(jià)第四組分呈現(xiàn)鮮味最佳，與電子舌對(duì)四種組分鮮味的對(duì)比分析結(jié)果一致。
　　(4)以乙基纖維素為壁材采用溶劑揮發(fā)法制備紫蘇肽微膠囊。通過對(duì)固形物含量、均質(zhì)時(shí)間、芯壁比和均質(zhì)速度的研究，確定了最佳的制備工藝條件為:固形物