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文檔簡介
1、多胺是細(xì)胞生長必須的生理活性物質(zhì),在細(xì)胞的增殖、潰瘍的愈合等中扮演著重要角色。多胺廣泛存在于生物體內(nèi),體內(nèi)天然多胺主要有腐胺、亞精胺和精胺等。研究表明腫瘤細(xì)胞細(xì)胞由于生長旺盛對多胺的需求明顯高于正常細(xì)胞,同時發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞膜上多胺轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)比正常細(xì)胞更為發(fā)達(dá),這有利于腫瘤細(xì)胞通過外源性攝取以獲取更多的多胺滿足自身的需求。天然多胺或人工合成的多胺鏈與細(xì)胞毒性藥物綴合后,腫瘤細(xì)胞膜上的多胺轉(zhuǎn)運(yùn)體同樣可以識別該綴合物并將其轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)從而產(chǎn)生較好
2、的靶向抗腫瘤作用。
本論文所涉及的化合物 MINS即是本課題組合成的萘酰亞胺-多胺綴合物,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均表明其具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性。本文主要研究MINS在小鼠體內(nèi)的組織和血液分布情況,及其對各個組織中和血液中多胺含量的影響,MINS含量測定和多胺(腐胺、亞精胺、精胺)含量測定用HPLC的檢測方法,檢測器均是熒光檢測器。MINS含量測定激發(fā)波長225 nm,發(fā)射波長745nm,BDS-C18柱,流動相甲醇:水=58:42,柱溫20
3、℃,保留時間7.0min左右,最低檢測限為0.5ng/mL。多胺測定的激發(fā)波長是340nm,發(fā)射波長是515nm,XDB-C18柱,流動相是甲醇:水=65:35-100:0,25min梯度洗脫,己二胺作為內(nèi)標(biāo)物,檢測限分別為腐胺0.19pmol、亞精胺0.20pmol、精胺0.23pmol。結(jié)果表明,注射MINS對小鼠各個組織多胺含量產(chǎn)生影響。
實(shí)驗(yàn)動物:昆明小鼠,由河南實(shí)驗(yàn)動物中心提供。小鼠分成兩組--正常組和肝損傷組。肝損
4、傷組小鼠的造模方法是:用0.6%的四氯化碳花生油溶液以0.1mL/10g腹腔注射來建立。以2mg/kg的MINS尾靜脈注射兩組小鼠,然后在15 min、30min、1h、3h、6h、12h、24h摘眼球取血并脫頸椎處死解剖,解剖取心、肝、脾、肺、腎、腦用PBS洗凈,用干燥紗布按相同組織每個時間點(diǎn)一組包好放入-80°C冰箱待測。EP管取血后放入4℃冰箱靜置2h,然后以速度3000 r/min離心,取上清放入超低溫冰箱待測。結(jié)果,15min
5、時正常組血清及心肝脾肺腎腦中MINS濃度與蛋白濃度比分別為0.7677、0.7830、0.6980、3.4915、2.1657、0g/g、,肝損傷組分別為0.2201、0、0.4445、6.0735、3.5431、2.3639、0.4814g/g。結(jié)果顯示,MINS在小鼠體內(nèi)分布迅速,且主要代謝和排泄器官是肝臟和腎臟。
采用Caco-2單層細(xì)胞模型評價MINS的吸收,由于Caco-2細(xì)胞在形態(tài)和功能上與小腸上皮細(xì)胞相似,所以C
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