CD151在直腸癌組織及尿液exosome小體中表達(dá)的對(duì)比研究.pdf

1、目的:Exosome小體是由多種細(xì)胞分泌的攜帶有細(xì)胞遺傳物質(zhì)及蛋白質(zhì)的小囊泡，在細(xì)胞間發(fā)揮物質(zhì)轉(zhuǎn)移及信號(hào)傳導(dǎo)作用，是近些年人們研究的熱點(diǎn)。Exosome小體可能攜帶某些對(duì)免疫功能調(diào)控的信息，可促進(jìn)腫瘤血管的新生和腫瘤轉(zhuǎn)移，以及可以直接作用于腫瘤細(xì)胞等途徑，影響腫瘤的進(jìn)展。本課題通過以自身正常粘膜組織做為對(duì)照，采用RT-PCR法以及Western blot方法檢測(cè)直腸癌患者癌組織以及正常粘膜組織中CD151mRNA以及CD151蛋白的表達(dá)

2、情況，同步采用Western blot方法檢測(cè)直腸癌患者以及健康志愿者尿液exosome小體中CD151蛋白表達(dá)情況，并結(jié)合臨床病理資料，對(duì)比觀察兩種方法檢測(cè)CD151基因在直腸癌患者體內(nèi)表達(dá)情況以及其與患者臨床病理特征的關(guān)系，同時(shí)尋求臨床無創(chuàng)檢測(cè)該基因表達(dá)情況的有效方法。
　　方法:
　　1、本研究分別采用RT-PCR法以及Western blot檢測(cè)法檢測(cè)40例直腸癌患者癌組織和癌旁粘膜組織（距癌組織邊緣≥10cm）中C

3、D151mRNA以及CD151蛋白的表達(dá)情況。
　　2、采用超速離心法進(jìn)行分離提取直腸癌患者及健康志愿者尿液中的exosome小體，采用Western blot檢測(cè)法檢測(cè)上述40例直腸癌患者以及40例健康志愿者尿液exosome小體中CD151蛋白表達(dá)情況。
　　3、最后通過對(duì)比患者癌組織與尿液exosome小體中CD151蛋白表達(dá)水平的差異，并結(jié)合臨床病理資料，分析其與直腸癌患者臨床病理學(xué)特征的關(guān)系，同時(shí)對(duì)比兩種檢測(cè)方法的

4、優(yōu)劣及可靠性。
　　結(jié)果:
　　1、直腸癌患者癌組織中CD151mRNA以及CD151蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著高于癌旁對(duì)照組。應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)結(jié)果顯示，在癌旁對(duì)照組中CD151mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.099±0.012，在直腸癌組中CD151mRNA的相對(duì)表達(dá)量為0.541±0.056。經(jīng)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析，CD151mRNA在直腸癌組織中相對(duì)表達(dá)量明顯高于癌旁正常組織(P＜0.05)。應(yīng)用Western blot檢測(cè)法

5、檢測(cè)結(jié)果顯示，在正常對(duì)照組中CD151蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.117±0.007，在直腸癌組中CD151蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.537±0.025。經(jīng)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析，CD151蛋白在直腸癌組織中相對(duì)表達(dá)量明顯高于癌旁正常組織(P＜0.05）。直腸癌組織中CD151蛋白以及CD151mRNA的相對(duì)表達(dá)量與患者病理特征進(jìn)行相關(guān)性分析，應(yīng)用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，結(jié)果顯示，CD151mRNA相對(duì)表達(dá)量以及CD151蛋白的相對(duì)表達(dá)量與患者

6、直腸癌臨床分期、浸潤(rùn)深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，與患者年齡、性別無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2、直腸癌患者尿液exosome小體中CD151蛋白水平的相對(duì)表達(dá)量顯著高于正常對(duì)照組。應(yīng)用Western blot檢測(cè)法檢測(cè)結(jié)果顯示，在正常對(duì)照組中CD151蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.153±0.015，在直腸癌組中CD151蛋白相對(duì)表達(dá)量為0.366±0.016。經(jīng)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析，C

7、D151蛋白在直腸癌患者尿液中相對(duì)表達(dá)量明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.05）。直腸癌患者尿液中CD151蛋白相對(duì)表達(dá)量與患者病理特征進(jìn)行相關(guān)性分析，應(yīng)用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。結(jié)果顯示，CD151蛋白的相對(duì)表達(dá)量與患者直腸癌臨床分期、浸潤(rùn)深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，與患者年齡、性別無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3、對(duì)直腸癌組患者癌組織以及尿液exosome小體中CD15

8、1蛋白表達(dá)率進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，在40例直腸癌患者癌組織中的陽性率為87.5％，在尿液exosome小體中的陽性率為82.5％，兩組比較x2=0.392，P=0.531，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果顯示CD151蛋白在直腸癌組織中與尿液exosome小體中的表達(dá)陽性率無差異，因此，采用Western blot檢測(cè)法檢測(cè)尿液exosome小體與癌組織中CD151蛋白表達(dá)的情況具有同樣的臨床指導(dǎo)意義。
　　結(jié)論:
　　1、

9、CD151可能參與直腸癌的發(fā)生及進(jìn)展過程，其表達(dá)水平與直腸癌病程進(jìn)展具有密切的關(guān)系。直腸癌組織中CD151mRNA的相對(duì)表達(dá)量以及CD151蛋白的相對(duì)表達(dá)量與直腸癌臨床分期、浸潤(rùn)深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，并且伴隨臨床分期的進(jìn)展、浸潤(rùn)深度的增加、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，CD151的相對(duì)表達(dá)量明顯增加。
　　2、采用Western blot法檢測(cè)尿液exosome小體中CD151蛋白水平的表達(dá)情況，與新鮮腫瘤組織檢測(cè)結(jié)果相似，同樣可反映C