Synuclein-γ在直腸癌組織中表達(dá)及與直腸癌中西醫(yī)臨床指標(biāo)關(guān)系的研究.pdf

1、中醫(yī)是應(yīng)用型科學(xué)，需要有堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)科學(xué)的支撐。西醫(yī)靠強(qiáng)大的現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)取得了飛速發(fā)展。中醫(yī)也應(yīng)該充分利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)發(fā)展的成果，為進(jìn)一步解釋中醫(yī)理論和拓展臨床治療尋求支撐。 中醫(yī)臨床研究中證型和證候是真實(shí)可靠的，但是因?yàn)槿狈陀^評價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)，讓人感覺既難以完全相信又沒法予7以否定。那么，應(yīng)當(dāng)怎樣正確記錄和評價(jià)中醫(yī)的臨床證型和證候？如何處理臨床研究中的共性與個(gè)性的關(guān)系？ 中醫(yī)具備形象思維和直覺思維能力、擁有“天人合一”整體思

2、維。但是在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)突飛猛進(jìn)的今天，在人類疾病譜、基因遺傳和生活環(huán)境與古代迥異的今天，還能夠無視科學(xué)技術(shù)在診治疾病中帶來的好處，固守不需任何儀器設(shè)備的幫助，用“司外揣內(nèi)”診斷疾病、僅僅延用古代理論和方法去治療疾??？ 中醫(yī)對于直腸癌的認(rèn)識起源于先秦，此后歷代醫(yī)家對直腸癌的病因病機(jī)進(jìn)行了論述。晉、隋、唐時(shí)期進(jìn)行了進(jìn)一步探索和研究，宋以后逐漸完善了對直腸癌的認(rèn)識。 中醫(yī)古典醫(yī)籍中無直腸癌病名。直腸癌的描述散在于“積聚’、“腸

3、覃”、“鎖肛痔”“臟癰痔”、“癥瘕”等病證的論述中。已認(rèn)識到直腸癌是一種全身性疾病，認(rèn)為其發(fā)生的根本病因是正氣虧虛，與脾胃功能密切相關(guān)。其兼挾病因?yàn)槠咔?、飲食、外感邪氣三種?，F(xiàn)代醫(yī)家認(rèn)為，直腸癌根本病機(jī)是機(jī)體陰陽失調(diào)，脾虛、腎虧、正氣不足為病之本，濕熱、火毒、瘀滯屬病之標(biāo)，常是幾種因素互為因果。因此對于直腸癌的中醫(yī)理論探索還任重道遠(yuǎn)。 由于不同學(xué)者受疾病認(rèn)識和不同的知識結(jié)構(gòu)等因素的影響，給中醫(yī)歸納總結(jié)不同學(xué)者的經(jīng)驗(yàn)帶來了困難。而

4、且經(jīng)驗(yàn)總結(jié)雖然為以后的中醫(yī)臨床研究提供了直腸癌證治規(guī)律的線索，但是無法用現(xiàn)代科學(xué)的指標(biāo)和語言對其進(jìn)行準(zhǔn)確的概括和量化，使這些經(jīng)驗(yàn)的可重復(fù)性和概括性以及今后的標(biāo)準(zhǔn)化受到了限制，也成了中醫(yī)持續(xù)向前發(fā)展的瓶頸。 實(shí)踐證明，中醫(yī)藥在直腸癌的綜合治療中效果是肯定的，但是直腸癌的中醫(yī)臨床研究雖有很多，也有以中醫(yī)為主治療直腸癌且取得滿意療效的報(bào)道，但多為個(gè)案報(bào)道，沒有嚴(yán)格設(shè)計(jì)的大宗病例的研究，少數(shù)還有比較嚴(yán)重的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析錯(cuò)誤，導(dǎo)致晚期直腸癌成

5、為目前中醫(yī)治療的主要對象?；颊呷頎顩r往往較差，經(jīng)中醫(yī)扶正祛邪，雖可使癥狀減輕，生存質(zhì)量提高，但多數(shù)已無治愈可能。隨著大眾醫(yī)療保健意識的增強(qiáng)，晚期病例越來越少，并且中醫(yī)治未病的優(yōu)勢仍然沒有發(fā)揮出來，這和中醫(yī)理論無法用現(xiàn)代科學(xué)理論解釋，中醫(yī)指標(biāo)無法用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)量化是有關(guān)的。 腫瘤中醫(yī)辯證分型是根據(jù)中醫(yī)理論對疾病過程中某一階段病因、病機(jī)、病性、病勢要素的綜合性概括，是對疾病當(dāng)前本質(zhì)做出的結(jié)論，是辨證施治的依據(jù)。腫瘤的西醫(yī)學(xué)指標(biāo)

6、反映了病變的程度和發(fā)展趨勢及腫瘤的生物學(xué)特性，因此，了解腫瘤的中醫(yī)學(xué)指標(biāo)與西醫(yī)學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系，有可能為中醫(yī)理論提供現(xiàn)代科學(xué)理論依據(jù)，為中醫(yī)指標(biāo)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)量化提供幫助。但是如何使直腸癌病因病機(jī)研究與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的科研成果相結(jié)合，并利用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的科研成果進(jìn)一步拓展和深入中醫(yī)直腸癌病因病機(jī)理論研究仍然需要探索。 中醫(yī)臨床以辨證論治為指導(dǎo)核心，“同病異治，異病同治”，處方用藥隨證而變。中醫(yī)“證”與西醫(yī)的病存在一定的分歧，而且中醫(yī)的

7、臨床特點(diǎn)決定了符合中醫(yī)醫(yī)理的大多中醫(yī)臨床研究難以完全嚴(yán)格按照隨機(jī)、對照、重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)和實(shí)施。另有一些研究只是臨床病例報(bào)告和描述，或是治療經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，這些研究由于沒有嚴(yán)格的科研設(shè)計(jì)和質(zhì)量控制方法而缺乏可信度。 本研究希望結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展成果，為進(jìn)一步理解中醫(yī)基礎(chǔ)理論和協(xié)助臨床治療提供方法和依據(jù)。 γ-syn是神經(jīng)核蛋白家族成員，正常主要位于神經(jīng)元的軸突內(nèi)。異常表達(dá)與許多腫瘤的發(fā)生、分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。SNCG

8、異常調(diào)節(jié)發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平，和SNCG低甲基化有關(guān)。γ-syn異常表達(dá)危害正常有絲分裂監(jiān)控點(diǎn)，使細(xì)胞通過非整倍體持續(xù)增殖，還可抑制半胱天冬酶活性，阻斷凋亡應(yīng)答；可通過MAPK途徑，使MMP基因表達(dá)增加，提高M(jìn)MP2活性和水平，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。γ-syn是潛在腫瘤生物標(biāo)志，用基因調(diào)控技術(shù)抑制腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)和針對γ-syn的分子靶向藥物研究正在進(jìn)行。 為了研究直腸癌組織中γ-syn蛋白的表達(dá)情況，我們選取2005年～2007年南京市中醫(yī)院肛

9、腸中心病理證實(shí)的直腸癌患者86例，收集手術(shù)切除的癌組織標(biāo)本進(jìn)行檢測。同時(shí)收集患者的人口學(xué)和臨床資料，包括年齡、性別、腫瘤距肛門距離、術(shù)前血清CEA水平、腫瘤分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。用免疫組織化學(xué)法檢測86例直腸癌組織γ-syn蛋白的表達(dá)。我們發(fā)現(xiàn)86例直腸癌組織中都有γ-syn蛋白的表達(dá)（86/86）。γ-syn蛋白的表達(dá)與患者年齡、性別、直腸癌部位、術(shù)前血清CEA水平之間無相關(guān)性；與直腸癌的組織分化程度，有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。表明直腸

10、癌組織高表達(dá)γ-syn蛋白；γ-syn蛋白是直腸癌普遍存在表達(dá)的蛋白，可以作為直腸癌的生物標(biāo)記。目前國內(nèi)文獻(xiàn)尚無γ-syn蛋白在直腸癌組織中表達(dá)的報(bào)道。 為了解γ-syn蛋白在直腸癌組織中表達(dá)調(diào)控的狀況，我們選取22對新鮮直腸癌組織標(biāo)本和相同直腸正常粘膜標(biāo)本，用甲基化特異PCR（methylation-specific PCR，MSP）技術(shù)來檢測直腸癌組織的γ-syn基因（SNCG）甲基化情況。我們發(fā)現(xiàn)，直腸癌組織中SNCG普遍

11、存在甲基化的現(xiàn)象。提示直腸癌中SNCG表達(dá)的調(diào)控，可能與SNCG某些CpG位點(diǎn)是否甲基化有關(guān)，而并非是SNCG整個(gè)基因的低甲基化。 為了解直腸癌的常見證候及其分布規(guī)律與現(xiàn)代西醫(yī)學(xué)指標(biāo)之間的聯(lián)系，我們選取2004年-2006年間在南京市中醫(yī)院全國肛腸醫(yī)療中心進(jìn)行手術(shù)治療并經(jīng)病理證實(shí)，符合納入標(biāo)準(zhǔn)的直腸癌患者71例（n=71）。將所有入選病例編號，在術(shù)前完成中、西醫(yī)指標(biāo)，術(shù)后完成病理分型，同時(shí)進(jìn)行相關(guān)性分析。我們發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)辨證分型在

12、西醫(yī)Dukes B、C期以氣血瘀滯型最為常見，以薄膩苔和弦澀脈多見；體重70.4％在正常范圍，25.4％體重超重。未見中醫(yī)虛證患者。氣血瘀滯型患者的腫瘤病變部位距肛門口的平均距離顯著大于濕熱毒蘊(yùn)型患者，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。我們認(rèn)為，目前直腸癌患者多為氣血瘀滯和濕熱毒蘊(yùn)型（西醫(yī)Dukes B、C期），中西醫(yī)指標(biāo)間有相似分布，可以相互佐證。氣血瘀滯型患者的腫瘤病變部位距肛門口的平均距離顯著大于濕熱毒蘊(yùn)型，術(shù)前分型為氣血瘀滯型保肛手

13、術(shù)的幾率較大。沒有發(fā)現(xiàn)中醫(yī)虛癥患者，我們分析認(rèn)為，這是因?yàn)橹蹦c癌和結(jié)腸癌對身體的影響不同造成的。結(jié)腸癌早期對人體營養(yǎng)物質(zhì)的攝取會造成影響，因此會出現(xiàn)虛癥表現(xiàn)。而直腸癌患者，到了晚期才會對人體的營養(yǎng)狀況產(chǎn)生影響，才會出現(xiàn)虛癥的表現(xiàn)。建議今后對于結(jié)腸和直腸癌的中醫(yī)診治應(yīng)該加以區(qū)分，以使中醫(yī)直腸癌的診斷治療更加具體可行。 我們選取2004年-2006年間在南京市中醫(yī)院全國中醫(yī)肛腸醫(yī)療中心進(jìn)行手術(shù)治療并符合納入標(biāo)準(zhǔn)的直腸癌患者71例（n

14、=71）。將所有入選病例編號，在術(shù)前完成中醫(yī)指標(biāo)，術(shù)后完成病理分型和癌組織中γ-syn表達(dá)的檢測，同時(shí)進(jìn)行相關(guān)性分析。我們發(fā)現(xiàn)氣血瘀滯型與濕熱毒蘊(yùn)型兩組患者γ-syn表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.54>0.05）。超重與非超重患者γ-syn表達(dá)，兩組間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.82>0.05）?；佁颊吲c薄膩苔兩組患者γ-syn表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.03<0.05）。弦澀脈患者與弦滑脈患者兩組患者γ-syn表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.03

15、<0.05）。我們認(rèn)為，直腸癌患者腫瘤組織中γ-syn表達(dá)與中醫(yī)分型沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。薄膩苔，弦滑脈患者與滑膩苔，弦澀脈患者γ-syn表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，有可能和其他指標(biāo)一起對直腸癌的中醫(yī)診斷治療起參考作用。但是早期直腸癌的中醫(yī)學(xué)常見證候及其分布與西醫(yī)學(xué)腫瘤生物標(biāo)記之間是否有其他的聯(lián)系和分布規(guī)律，還需要大樣本的多中心隨機(jī)對照研究去證明。 通過本研究，我們得出以下結(jié)論：1.γ-syn蛋白是直腸癌普遍存在表達(dá)的蛋白，可以作為直腸癌的生

16、物標(biāo)記。目前國內(nèi)文獻(xiàn)尚無γ-syn蛋白在直腸癌組織中表達(dá)的報(bào)道。2.目前直腸癌患者（西醫(yī)Dukes B、C期）多為氣血瘀滯和濕熱毒蘊(yùn)型。氣血瘀滯型患者的腫瘤病變部位距肛門口的平均距離顯著大于濕熱毒蘊(yùn)型，推測術(shù)前分型為氣血瘀滯型保肛手術(shù)的幾率較大。3.沒有發(fā)現(xiàn)中醫(yī)虛癥患者，結(jié)腸癌和直腸癌由于對機(jī)體影響不同，其中醫(yī)診治應(yīng)該加以區(qū)分，以使中醫(yī)直腸癌的診斷治療更加具體可行。4.薄膩苔，弦滑脈患者γ-syn表達(dá)呈梯度上升，滑膩苔和弦澀脈患者γ-s

17、yn表達(dá)以2+為主，有可能和其他指標(biāo)一起對直腸癌的中醫(yī)診斷治療起參考作用。但是早期直腸癌的中醫(yī)學(xué)指標(biāo)和西醫(yī)學(xué)腫瘤生物標(biāo)記之間是否有其他的聯(lián)系和分布規(guī)律，還需要大樣本的多中心隨機(jī)對照研究去證明。5.直腸癌組織中SNCG普遍存在甲基化的現(xiàn)象。提示直腸癌中SNCG表達(dá)的調(diào)控，可能與SNCG某些CpG位點(diǎn)是否甲基化有關(guān)，而并非是SNCG整個(gè)基因的低甲基化。 通過本研究，我們也提出了一個(gè)研究思路，即是否可以通過研究西醫(yī)臨床指標(biāo)與中醫(yī)證型證