JNK-SAPK及Akt信號通路在人結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展和多藥耐藥中的作用.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文JNKSAPK及Akt信號通路在人結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展和多藥耐藥中的作用姓名：朱明明申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系?。┲笇?dǎo)教師：冉志華201104上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文中文摘要摘要2JNK／SAPK信號通路在人結(jié)腸癌羥基喜樹堿多藥耐藥中的作用目的：探討JNK／SAPK信號通路在羥基喜樹堿誘導(dǎo)的結(jié)腸癌細胞耐藥過程中的作用，以及對耐藥轉(zhuǎn)運體的表達和轉(zhuǎn)運功能的調(diào)控。方法g我們以親本細胞株SWlll6和耐藥細

2、胞株SWl116／HCPT為研究對象，先檢測兩種細胞中JNK活性的變化，并以可抑制JNK活化的特異性抑制劑SP600125和州K1／2siI塒A為工具，阻斷JNK信號傳導(dǎo)通路，觀察耐藥細胞中INK活性、耐藥蛋白的表達、藥物外排情況、細胞凋亡以及對羥基喜樹堿敏感性的變化，以探討JNK信號通路與結(jié)腸癌細胞耐羥基喜樹堿機制之間的內(nèi)在聯(lián)系。結(jié)果：實驗發(fā)現(xiàn)在耐藥細胞SWIl16／HCPT中INK、cJun、ATF2的磷酸化水平明顯高于親本細胞SW

3、lll6。用SP600125可明顯抑制JNK通路活性，在作用48h后可使耐藥細胞中耐藥蛋白ABCG2的mRNA水平下降6783士310％，蛋白水平下降5429a：519％，細胞內(nèi)Rhl23的蓄積量增加了476029倍。SP600125還可促進凋亡蛋白PARP的剪切，下調(diào)抗凋亡蛋白survivin和bcl2的表達，明顯增加耐藥細胞對羥基喜樹堿的敏感性。JNKl和YNK2兩個靶基因靜默引起的生物學(xué)效應(yīng)卻不相同：JNKl基因靜默能加強下游cJ

4、un、ATF2蛋白的去磷酸化，明顯下調(diào)ABCG2基因和蛋白水平的表達及耐藥蛋白轉(zhuǎn)運功能，能顯著增加耐藥細胞對羥基喜樹堿的敏感性。而JNK2基因靜默對下游轉(zhuǎn)錄因子的活性無明顯影響，雖可下調(diào)ABCG2mRNA的表達水平，但對ABCG2蛋白表達卻無明顯調(diào)節(jié)功能，也不能增加耐藥細胞對羥基喜樹堿的敏感性。結(jié)論：JNK通路參與了羥基喜樹堿誘導(dǎo)的結(jié)腸癌多藥耐藥，其高表達預(yù)示了化療效果不佳，抑制其通路可能成為逆轉(zhuǎn)耐藥的新靶點。但不同的INK異構(gòu)體在羥基