β-catenin異位分布及影響因素在我國結(jié)直腸癌發(fā)生演進(jìn)中的作用.pdf

1、以β-連環(huán)蛋白(β-catenin)為中心的Wnt通路的異常激活通常發(fā)生在結(jié)直腸癌發(fā)生演進(jìn)的早期階段。β-catenin在胞漿內(nèi)異常蓄積并進(jìn)入細(xì)胞核，是Wnt通路激活的關(guān)鍵事件，可能與大腸癌的發(fā)生演進(jìn)過程以及臨床病理因素密切相關(guān)。然而，引起β-catenin異位分布的確切機(jī)制目前仍不清楚，環(huán)氧合酶-2(COX-2)過表達(dá)、APC基因突變、E-cadherin膜表達(dá)缺失和β-catenin基因(CTNNB1)外顯子3突變等因素，都有可能通

2、過影響β-catenin異位分布而在大腸癌發(fā)生演進(jìn)中起著重要的作用。 本研究在206例正常大腸粘膜組織、腺瘤和腺癌組織中，應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測β-catenin、APC、COX-2和E-cadherin蛋白在組織細(xì)胞中的表達(dá)，分析了它們在大腸癌進(jìn)展中的作用及其在臨床病理及預(yù)后中的意義，探討了APC、COX-2、E-cadherin表達(dá)異常、CTNNB1基因外顯子3突變與β-catenin異位分布的相關(guān)性，特別是在APC蛋白不

3、同表達(dá)條件下，COX-2過表達(dá)對β-catenin異位分布的影響；同時，以家族性腺瘤息肉病(FAP)患者作為研究對象，分別應(yīng)用基因突變系統(tǒng)篩查方法和甲基化特異性PCR篩查APC基因突變及啟動子區(qū)高甲基化，研究我國大腸癌早期APC基因突變的特點。 研究結(jié)果顯示：(1)β-catenin的異位分布參與結(jié)直腸癌進(jìn)展的早期階段，并且與結(jié)直腸癌的臨床Dukes分期、組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及5年生存率顯著相關(guān)(P<0.05)；E-cad

4、herin膜表達(dá)減少與結(jié)直腸癌進(jìn)展的后期，臨床Dukes分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及5年生存率顯著相關(guān)(P<0.05)；(2)β-catenin異位分布與COX-2過表達(dá)以及APC失表達(dá)密切相關(guān)，其中COX-2過表達(dá)和β-catenin異位分布的顯著相關(guān)性僅出現(xiàn)在APC蛋白失表達(dá)組(Spearman’s相關(guān)系數(shù)r=0.233，P=0.013)；(3)本研究中的FAP患者中，共檢測出三種APC基因胚系突變，分別為c.3184 3187 delCA

5、AA：c.1999C>T；c.5432C>T。在1例FAP患者在腺瘤組織中檢測出等位基因雜合性缺失，2例檢測出啟動子區(qū)高甲基化，并與FAP癥狀嚴(yán)重性密切相關(guān)。在大腸癌組織中，未篩查到CTNNBl基因外顯子3的突變。以上結(jié)果提示W(wǎng)nt通路中β-catenin異位分布參與了大腸癌的早期進(jìn)展階段，而且與多種臨床病理學(xué)指標(biāo)以及不良預(yù)后顯著相關(guān)，β-catenin異位分布有望作為大腸癌進(jìn)展程度、細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化和預(yù)后判斷的分子標(biāo)記；β-catenin

6、異位分布與COX-2過表達(dá)和APC表達(dá)缺失顯著相關(guān)性，而且APC蛋白表達(dá)狀況對于COX-2與β-catenin相關(guān)性有重要影響；而E-cadherin膜表達(dá)減少、CTNNBl基因外顯子3突變不是β-catenin異位分布的主要原因；通過對我國FAP患者APC基因突變篩查，不僅發(fā)現(xiàn)了2種新的胚系突變，而且體細(xì)胞性突變與胚系突變位點的關(guān)系也與西方高加索人的研究有區(qū)別，提示我國大腸癌發(fā)生早期APC基因的突變可能具有自身的特點。 本研究