MICAL2在結(jié)直腸癌變中的作用及分子機制研究.pdf

1、目的：
　　據(jù)報道全球全球每年有超過一百萬的結(jié)直腸癌新發(fā)病例，嚴(yán)重影響人類健康。人類MICAL2（Molecule Interacting with CasL2）基因是人類MICAL家族基因的重要組成部分，相對于其家族成員MICAL1，MICAL2基因的研究較少。而在腫瘤研究領(lǐng)域，僅在前列腺癌研究中發(fā)現(xiàn)MICAL2基因的前列腺癌變異體與前列腺癌進展相關(guān)。所以我們在結(jié)直腸癌中對MICAL2基因進行研究，以明確MICAL2基因在結(jié)直腸

2、癌進展中的作用，并期望可以為結(jié)直腸癌的診療提供新的分子標(biāo)志和作用靶點。
　　方法：
　?。?）免疫組織化學(xué)檢測具有完整生存資料的結(jié)直腸癌組織芯片，分析癌與癌旁組織中MICAL2的表達差異，生存分析研究MICAL2與結(jié)直腸癌病人預(yù)后的關(guān)系。
　?。?）在結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT116和SW480細(xì)胞株中采用shRNA構(gòu)建穩(wěn)定敲低的MICAL2細(xì)胞株，并采用MTT和克隆形成實驗檢測MICAL2基因?qū)?xì)胞生長與克隆形成的影響。

3、r>　?。?）在穩(wěn)定敲低MICAL2基因的HCT116細(xì)胞株中，使用double thymidine進行G1/S期阻滯，釋放后流式細(xì)胞儀檢測進入S期細(xì)胞的快慢。
　　結(jié)果：
　　（1）結(jié)直腸癌癌組織中的MICAL2蛋白水平明顯高于癌旁組織，MICAL2蛋白高表達提示病人預(yù)后較差。
　　（2）在HCT116和SW480細(xì)胞中敲低MICAL2基因后，細(xì)胞生長和克隆形成能力受到抑制。
　?。?）敲低MICAL2基因后，