Cyclopamine對正常和肝硬化大鼠肝臟星狀細(xì)胞活化、增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：研究Hedgehog(Hh)信號通路抑制劑-環(huán)巴明(cyclopamine)對正常和肝硬化大鼠肝星狀細(xì)胞（Hepatic stellate cell，HSC）活化、增殖和凋亡的影響。
　　 方法：20只雄性SD大鼠隨機(jī)分為2組：第一組為正常大鼠(n=10)；第二組為肝硬化大鼠(n=10)。后組采用硫代乙酰胺(Thioacetamide，TAA)飼喂法復(fù)制肝硬化模型。分別提取兩組大鼠HSC，體外培養(yǎng)、擴(kuò)增后，免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒

2、定。分別用cyclopamine干預(yù)正常和肝硬化大鼠的HSC，并設(shè)置相應(yīng)對照組。實驗分為以下4組：(1)正常大鼠HSC對照組（A組）；(2)正常大鼠HSC cyclopamine組（B組）；(3)肝硬化大鼠HSC對照組（C組）；(4)肝硬化大鼠HSC cyclopamine組（D組）。
　　 MTT法、流式法檢測cyclopamine對HSC增殖、凋亡的影響，蛋白印記法(Western-blot)檢測其對HSC活化標(biāo)記物α-平滑

3、肌肌動蛋白(a-smooth muscle actin，a-SMA)表達(dá)水平的影響。
　　 結(jié)果：成功構(gòu)建大鼠肝硬化模型。成功分離得到HSC。與相應(yīng)對照組相比，正常和肝硬化大鼠HSC cyclopamine組細(xì)胞增殖抑制率及凋亡率均明顯增高(P＜0.05)，且a-SMA蛋白表達(dá)水平均明顯降低（P＜0.05）。與正常大鼠HSC cyclopamine組相比，肝硬化大鼠HSC cyclopamine組細(xì)胞增殖抑制率、凋亡率以及α-S