骨化三醇對UUO大鼠腎小管上皮細(xì)胞-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)旨在檢測3~4周齡雄性SD大鼠單側(cè)輸尿管梗阻模型（UUO模型）腎組織中α-肌動蛋白（α-SMA）、E-鈣黏蛋白（E-Cad）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、骨形態(tài)發(fā)生蛋白-7（BMP-7）mRNA的表達(dá)，從而探討骨化三醇對UUO大鼠腎小管上皮細(xì)胞-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化（EMT）的干預(yù)效應(yīng)及相關(guān)機(jī)制。
　　方法：將54只3-4周齡的雄性SD大鼠隨機(jī)等分為3組：假手術(shù)組18只、UUO模型組18只及UUO模型骨化三醇干預(yù)組18只

2、，采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎的方法制備大鼠腎間質(zhì)纖維化模型（UUO模型）。于手術(shù)后第1天起，干預(yù)組給予骨化三醇0.1ug/(kg·d)溶于0.2ml的花生油中灌胃，其余兩組均給予等量花生油灌胃。灌胃分別滿3天、7天、14天使每組各取6只大鼠并處死，取大鼠腎組織。利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測各組大鼠腎組織中α-SMA、E-Cad、TGF-β1、BMP-7mRNA表達(dá)水平變化。
　　結(jié)果：1.采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)制備腎間

3、質(zhì)纖維化模型成功，結(jié)扎側(cè)腎臟體積明顯變大，皮質(zhì)變薄。2.RT-PCR法檢測各組各時(shí)間點(diǎn)腎組織中α-SMA、E-Cad、TGF-β1、BMP-7mRNA表達(dá)結(jié)果：假手術(shù)組大鼠腎組織α-SMA、TGF-β1mRNA表達(dá)表達(dá)甚微，E-Cad、BMP-7mRNA表達(dá)非常豐富，各時(shí)間點(diǎn)組內(nèi)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；隨著梗阻時(shí)間的延長，UUO模型組大鼠腎組織中α-SMA、TGF-β1mRNA表達(dá)進(jìn)行性上調(diào)（P<0.01），且較假手術(shù)組顯著增

4、加（P<0.01），而UUO模型組中E-Cad、BMP-7mRNA表達(dá)進(jìn)行性下降（P<0.01），且較假手術(shù)組明顯減弱（P<0.01）；與UUO模型組相比，UUO模型骨化三醇干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)α-SMA、TGF-β1mRNA表達(dá)明顯受抑，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），但仍顯著高于假手術(shù)組（P<0.01），而E-Cad、BMP-7mRNA表達(dá)較UUO模型組明顯增加，但仍顯著低于假手術(shù)組（P<0.01）。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步說