慢性鋁過(guò)負(fù)荷致小鼠神經(jīng)元退變與SOD2表達(dá)和金屬離子關(guān)系的初步研究.pdf

1、目的：采用慢性經(jīng)胃腸道給予鋁中毒模型，觀察鋁過(guò)負(fù)荷致神經(jīng)元退行性變與腦內(nèi)抗氧化應(yīng)激酶系SOD2表達(dá)和鐵、錳離子水平關(guān)系，探討慢性鋁負(fù)荷致神經(jīng)元退行性變的可能機(jī)制。 方法：1、動(dòng)物分組和模型建立：通過(guò)灌胃給予模型組小鼠葡萄糖酸鋁0．2ml／10g體重／每天(相當(dāng)于A1400mg／kg/day)，對(duì)照組給予等體積溶劑，1周給予6d，連續(xù)3mo。建立鋁負(fù)荷動(dòng)物模型。2、行為學(xué)測(cè)試：自發(fā)活動(dòng)、明暗刺激、程控水迷宮。3、形態(tài)學(xué)：常規(guī)石蠟切

2、片，HE染色，觀察海馬區(qū)神經(jīng)元的病理形態(tài)學(xué)變化。4、生化指標(biāo)測(cè)定：金屬離子采用等離子體原子發(fā)射光譜(ICP-AES)法測(cè)定TP、MDA、SOD活性按市售藥盒提供的方法測(cè)定。用RT-PCR方法觀察皮層和海馬SOD2mRNA表達(dá)的變化。用westernblotting方法檢測(cè)皮層和海馬SOD2蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果：鋁過(guò)負(fù)荷能明顯導(dǎo)致小鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙(明暗刺激試驗(yàn)結(jié)果顯示鋁負(fù)荷各組潛伏期明顯縮短；水迷宮結(jié)果顯示鋁負(fù)荷組尋臺(tái)時(shí)間明

3、顯延長(zhǎng))。生化檢測(cè)鋁過(guò)負(fù)荷組海馬、皮質(zhì)中SOD和SOD2出現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，海馬、皮質(zhì)中的MDA從1月開(kāi)始出現(xiàn)明顯的升高趨勢(shì)，對(duì)照組均無(wú)明顯變化。RT-PCR結(jié)果顯示鋁過(guò)負(fù)荷組腦組織SOD2mRNA表達(dá)出現(xiàn)時(shí)間依賴(lài)性升高，westernblotting檢測(cè)SOD2蛋白質(zhì)表達(dá)時(shí)間依賴(lài)性增加。金屬離子檢測(cè)中，鋁過(guò)負(fù)荷組腦組織中皮層與海馬的鐵、錳含量較對(duì)照組明顯升高，且呈現(xiàn)出一定的時(shí)效關(guān)系，進(jìn)行多元逐步回歸分析發(fā)現(xiàn)，鐵、錳離子對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記

4、憶的損傷具有顯著性影響。病理切片顯示：鋁過(guò)負(fù)荷能明顯導(dǎo)致小鼠海馬神經(jīng)元丟失和核固縮。 結(jié)論：慢性鋁過(guò)負(fù)荷致小鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙涉及腦內(nèi)鐵、錳等金屬離子代謝紊亂和SOD和SOD2表達(dá)增加但活性降低；提示在機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激損傷的時(shí)候，抗氧化應(yīng)激系統(tǒng)功能會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)，但持續(xù)的氧化應(yīng)激增強(qiáng)可能損傷與SOD2表達(dá)相關(guān)的基因，導(dǎo)致無(wú)功能或功能降低的抗氧化應(yīng)激酶SOD2增加。金屬離子的代謝紊亂提示，在慢性鋁過(guò)負(fù)荷導(dǎo)致的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙中鐵、錳可