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文檔簡(jiǎn)介
1、自然界中動(dòng)植物以及人類(lèi)的生理活動(dòng)、生活習(xí)性都有著白天和黑夜的不同。這種近似24小時(shí)的近日節(jié)律性是由內(nèi)在的生物鐘產(chǎn)生的。這種生物鐘的節(jié)律性振蕩是由一系列生物種基因組成的正負(fù)反饋環(huán)路。Per1、Per2作為核心生物鐘基因在近日節(jié)律的產(chǎn)生和維持當(dāng)中是至關(guān)重要的。Per1、Per2基因的突變或缺失,表達(dá)的異??梢砸鹕飼円构?jié)律紊亂或消失,繼之導(dǎo)致疾病的發(fā)生或促進(jìn)疾病的發(fā)展,促使過(guò)早的衰老、腫瘤的發(fā)生。而通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)增加Per1、Per2基因
2、在腫瘤細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)可以抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。惡性膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見(jiàn)的中樞性神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤,手術(shù)難以全切,放化療由于副作用較大,不能很好的發(fā)揮作用。
研究背景和目的:研究發(fā)現(xiàn)生物鐘基因Per1、Per2的突變或缺失與乳腺癌、肺癌及淋巴瘤等惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系。目前尚未有有關(guān)膠質(zhì)瘤與生物鐘基因之間相關(guān)的研究。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谔接懩z質(zhì)瘤與生物鐘基因Per1、Per2之間的關(guān)系。
試驗(yàn)方法:進(jìn)行
3、細(xì)胞株的培養(yǎng),PMA誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生生物鐘基因的表達(dá)。取不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞,采用免疫組織化學(xué)法和RT-PCR檢測(cè)體外培養(yǎng)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞的Per1、Per2基因表達(dá)的差異。
結(jié)果:對(duì)免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果用Image pro-Plus進(jìn)行處理,方差分析結(jié)果顯示PMA刺激誘導(dǎo)的NIH3T3細(xì)胞中Per1、Per2基因的表達(dá)表現(xiàn)為近日節(jié)律,而PMA刺激誘導(dǎo)的C6細(xì)胞中Per1、Per2基因的表達(dá)不表現(xiàn)為近日節(jié)律,NIH3T3細(xì)胞中P
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