阿司匹林對BMSCs移植治療大鼠腦缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、目的：
　　采用不同劑量阿司匹林(Aspirin/acetylsalicylic acid ASA)干預(yù)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone marrow stromal cells BMSCs）移植治療大鼠腦缺血再灌注損傷，觀察各組血清TNF-α濃度、神經(jīng)功能評分、caspase-3表達(dá)，探討阿司匹林對BMSCs移植治療大鼠腦缺血再灌注損傷的影響及作用機理。
　　方法：
　　利用線栓法制作SD大鼠大腦中動脈阻塞(Middle

2、cerebral artery occlusion MCAO)模型(n=48)。根據(jù)完全隨機原則分為：模型自然恢復(fù)組（A組），BMSCs移植組（B組）、阿司匹林干預(yù)組（C組）和阿司匹林干預(yù)BMSCs移植組（D組）。C、D組根據(jù)阿司匹林的劑量各分為三個亞組（阿司匹林劑量：C1、D1亞組3.75mg/kg/d，C2、D2亞組7.5mg/kg/d，C3、D3亞組22.5mg/kg/d），C、D組各亞組在再灌注120小時后開始按照分組每日予以不

3、同劑量阿司匹林溶入0.5ml蒸餾水灌胃給藥；A組為MCAO再灌注大鼠模型組；B、D組進行BMSCs移植，于缺血2小時再灌注146小時后，通過尾靜脈注射2×106 BMSCs每只大鼠。第14天，分別檢測血清TNF-α濃度，評價神經(jīng)行為學(xué)評分，HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，測定caspase-3的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1．神經(jīng)行為學(xué)評分（單位：分）:A組3.76±0.42，B組2.04±0.28，C組：C1亞組3.91±0.35、

4、C2亞組3.83±0.62、C3亞組3.92±0.60，D組：D1亞組1.69±0.16、D2亞組1.17±0.11、D3亞組2.25±0.17。A組與B組及D組各亞組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），A組高于B組及D組各亞組；A組與C組各亞組相比無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）； B組與D組各亞組相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），B組高于D組各亞組； D組各亞組間兩兩相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），D3組最高，D2組最低。
　　

5、2.血清TNF-α酶聯(lián)免疫試劑盒測定（單位：ng/ml）：A組7.69±0.54，B組6.27±0.42，C組：C1亞組5.59±0.20、C2亞組5.59±0.20、C3亞組1.52±0.36，D組：D1亞組4.76±0.52、D2亞組2.47±0.3、D3亞組0.75±0.18。A組與B組、C組各亞組及D組各亞組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），A組高于B組、C組各亞組及D組各亞組； B組與D組各亞組相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05

6、），B組高于D組各亞組；C組各亞組與D組各亞組按劑量兩兩相比均具有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），C組高于D組；C組各亞組間兩兩相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），C1組最高，C3組最低；D組各亞組間兩兩相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），D1組最高，D3組最低。
　　3.腦組織切片HE染色顯示：A組：神經(jīng)組織大片壞死，周圍殘存組織結(jié)構(gòu)不完整，神經(jīng)細(xì)胞水腫明顯，大量空泡形成組織明顯水腫，神經(jīng)細(xì)胞體積增大，空泡變性，細(xì)胞間隙增大；B組：大鼠

7、腦組織結(jié)構(gòu)明顯改善、較之A組壞死區(qū)域縮小，梗死灶周圍殘存組織較多；C組：大鼠腦組織壞死及受損與A大致相當(dāng)；D組：細(xì)胞受損較BMSCs移植組明顯減輕，梗死范圍縮小，細(xì)胞較為完整，間隙水腫輕微，其中D2亞組神經(jīng)細(xì)胞最為完整，D1亞組次之，D3亞組在D組中稍差。
　　4. caspase-3免疫組化染色（單位：個）：A組396.70±59.68，B組292.35±31.62，C組：C1亞組392.02±50.12、C2亞組382.59±

8、31.06、C3亞組379.66±25.33，D組：D1組188.40±32.29、D2組120.43±13.04、D3組251.68±13.30。A組與B組及D組各亞組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），A組高于B組及D組各亞組；A組與C組各亞組相比無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）； B組與D組各亞組相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），B組高于D組各亞組；D組各亞組間兩兩相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），D3亞組最高，D2亞組最低。