海南粗榧內(nèi)生真菌的篩選與發(fā)酵產(chǎn)物的初步研究.pdf

1、本研究利用植物內(nèi)生菌與宿主植物長(zhǎng)年協(xié)同進(jìn)化，發(fā)生基因漂移可能性大這一優(yōu)勢(shì)，從各地區(qū)的海南粗榧樣品中分離內(nèi)生真菌，并檢測(cè)這些內(nèi)生真菌是否能產(chǎn)高三尖杉酯堿或具備產(chǎn)生高三尖杉酯堿的潛力。 目前已經(jīng)分離得到214株海南粗榧內(nèi)生真菌，通過顯微形態(tài)觀察和菌落形態(tài)觀察，對(duì)其中的134株進(jìn)行了簡(jiǎn)單的種屬鑒定，分屬39個(gè)屬，未知屬的有37株，種屬分布范圍非常廣。建立了內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物中生物堿提取的工藝流程，可以穩(wěn)定地從海南粗榧內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物中提

2、取生物堿類物質(zhì)。 通過HPLC-UV的方法檢測(cè)了其中24株內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物中的生物堿類物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)有6株內(nèi)生真菌的發(fā)酵產(chǎn)物中包含與高三尖杉酯堿標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間相似的生物堿；對(duì)保留時(shí)間相似的發(fā)酵產(chǎn)物添加標(biāo)準(zhǔn)品作為內(nèi)標(biāo)，發(fā)現(xiàn)菌株54041307的一個(gè)發(fā)酵產(chǎn)物可與高三尖杉酯堿標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生融合峰；對(duì)該發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行HPLC-MS和MS-MS檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)該發(fā)酵產(chǎn)物與高三尖杉酯堿標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)譜圖和二級(jí)質(zhì)譜圖完全相同，由此判斷該菌株可產(chǎn)高三尖杉酯堿。