建立同步細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)及檢測不同狀態(tài)酪氨酸酶活性方法研究中藥單體對人正常黑素細(xì)胞功能的影響.pdf

1、二十世紀(jì)末,Kubo等指出藥物對不同狀態(tài)的TYR影響也是不同的.要研究藥物對TYR活性的影響,應(yīng)觀察藥物對不同狀態(tài)TYR的影響.為此,我們建立了蘑菇TYR多巴速率氧化法,并運(yùn)用這一檢測方法研究分析了5-MOP等中藥單體對靜息態(tài)(met)、活化態(tài)(oxy)蘑菇TYR的影響.MC、KC、FC是皮膚細(xì)胞的主要組成成分,它們具有不同的生物學(xué)功能,相互間又具有緊密不可分隔的聯(lián)系和作用.它們的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能等變化都會引起皮膚發(fā)生相應(yīng)的改變,所以體

2、外培養(yǎng)MC、KC、FC已成為研究皮膚病病因、發(fā)病機(jī)理、藥物作用機(jī)理的模型.我們吸取國內(nèi)外和該實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn),成功地建立了用同一皮膚標(biāo)本同時(shí)培養(yǎng)MC、KC、FC的技術(shù)方法.并在此基礎(chǔ)上,參考5-MOP等四種中藥單體對不同狀態(tài)蘑菇TYR的作用結(jié)果,研究分析了這四種中藥單體對體外培養(yǎng)的MC的TYR活性和細(xì)胞增殖的影響.現(xiàn)將工作情況歸納如下:一、用同一皮膚標(biāo)本同時(shí)培養(yǎng)、純化人表皮正常MC、KC和FC;二、5-MOP、8-MOP、山柰素和芍藥甙等中

3、藥單體對靜息態(tài)(met)和活化態(tài)(oxy)蘑菇TYR活性的影響.為了深入探討藥物對不同狀態(tài)TYR的作用和作用的靶點(diǎn),我們建立運(yùn)用了蘑菇TYR多巴速率氧化法,觀測了5-MOP等四種中藥單體對oxy-TYR和met-TYR活性的影響.三、5-MOP等對人正常黑素細(xì)胞的TYR活性和增殖的影響.在初步觀察5-MOP等四種中藥單體對蘑菇TYR活性影響的基礎(chǔ)上,我們運(yùn)用多巴氧化酶活性測定方法,進(jìn)一步研究了5-MOP、山柰素對MC的TYR活性的影響.