四種中藥單體對HepG2細(xì)胞枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶9表達(dá)的影響.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化（As）危險(xiǎn)因素眾多，其中高血脂是As形成的主要危險(xiǎn)因素之一，血漿膽固醇水平升高能夠在缺乏其他危險(xiǎn)因素的情況下獨(dú)立地誘發(fā)As，其水平升高與As發(fā)病率呈正相關(guān)。因此降低血膽固醇水平成為治療As的關(guān)鍵。
　　枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶9（PCSK9）是2003年應(yīng)用生物信息學(xué)方法和DNA微陣列技術(shù)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)與血液膽固醇代謝調(diào)節(jié)相關(guān)的基因。研究發(fā)現(xiàn)PCSK9的主要作用是降解肝臟低密度脂蛋白受體（LDLR），從而影響血脂水平。以PCSK

2、9為靶點(diǎn)的新藥篩選是目前一個(gè)研究熱點(diǎn)，有效的抗PCSK9新藥的發(fā)現(xiàn)被認(rèn)為可能是繼他汀類藥物之后降脂藥物研究領(lǐng)域的又一重要革命。
　　齊墩果酸(OA)、熊果酸(UA)、槲皮素(Que)和金絲桃苷( Hyp)是四種天然來源的化合物。OA和UA為五環(huán)三萜類化合物，Que是一種多羥基黃酮類化合物，Hyp屬于黃酮醇苷類化合物，均廣泛存在于自然界中。大量研究均表明OA、Que、UA和Hyp具有顯著的降血脂作用，能夠調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，但它們的降血脂

3、作用是否與PCSK9有關(guān)卻未見報(bào)道。
　　目的：觀察OA、Que、UA和Hyp對HepG2細(xì)胞PCSK9表達(dá)的影響，為尋找新型降血脂藥物提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。
　　方法：體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞，用不同濃度的4種藥物分別作用HepG2細(xì)胞24 h后，用RT-PCR、Western Blot分別檢測PCSK9 mRNA和蛋白的表達(dá)。用MTT法檢測細(xì)胞活力的情況。篩選出可抑制PCSK9表達(dá)的藥物，選擇最佳藥物濃度，處理HepG2細(xì)胞0

4、、3、6、12、24 h后，用RT-PCR、Western Blot分別檢測PCSK9 mRNA和蛋白的表達(dá)，觀察其抑制作用是否存在時(shí)間依賴性。
　　結(jié)果：Que、UA和Hyp對HepG2細(xì)胞PCSK9 mRNA的表達(dá)沒有影響，75μmol/L和100μmol/L OA組與空白對照組比較 PCSK9 mRNA和蛋白的表達(dá)明顯減少，并呈一定的劑量依賴性。100μmol/L OA處理HepG2細(xì)胞3、6、12、24 h后，PCSK9