C-KIT基因突變?cè)诎閠（8;21）M2型急性髓系白血病中的分析.pdf

1、背景與目的： C-KIT受體是一種由C-KIT原癌基因編碼的Ⅲ型跨膜受體酪氨酸激酶，其配體為干細(xì)胞因子(stem cell factor，SCF)，C-KIT基因突變引起C-KIT受體的持續(xù)活化，從而賦予了造血前體細(xì)胞增殖或生存優(yōu)勢(shì)。至今有多篇文章報(bào)道了在核心結(jié)合因子相關(guān)性急性髓系白血病(core binding factor-AML，CBF-AMU)患者中C-KIT基因第8和17號(hào)外顯子突變的發(fā)生率較高，成為目前CBF-AML

2、患者中最常見的一種分子遺傳學(xué)異常；且發(fā)生C-KIT基因突變的CBF-AML患者具有相對(duì)特異的臨床特征和預(yù)后。鑒于現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)尚無大樣本病例的相關(guān)臨床研究，收集了78例成人伴t(8；21)AML-M2患者的初診骨髓標(biāo)本，從以下三方面進(jìn)行研究： (1)檢測(cè)C-KIT基因第8和第17號(hào)外顯子突變?cè)?8例伴t(8；21)AML-M2患者中的發(fā)生率及突變類型； (2)分析C-KIT基因突變陽性患者的臨床資料探討其臨床特征及預(yù)后，了解

3、此基因突變對(duì)臨床預(yù)后的影響； (3)同時(shí)檢測(cè)了JAK2V617F基因突變，了解這兩種基因突變發(fā)生的關(guān)系及對(duì)預(yù)后的影響。 病例與方法：78例成人t(8；21)AML-M2患者來自2004年2月～2008年1月我單位住院或門診初診病例，其中男性43例、女性35例；年齡在14～77歲之間，中位年齡為37歲。所有患者經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、免疫表型、染色體和融合基因檢查確診。主要研究方法： (1)應(yīng)用基因組DNA-聚合酶鏈反應(yīng)

4、(polymerase chain reaction，PCR)擴(kuò)增C-KIT基因第8和17號(hào)外顯子，將PCR產(chǎn)物回收純化后進(jìn)行基因測(cè)序； (2)分析78例t(8；21)M2患者的臨床及實(shí)驗(yàn)室資料，了解C-KIT基因突變陽性患者的臨床特征； (3)隨訪上述患者了解其對(duì)治療的反應(yīng)、持續(xù)緩解以及生存情況，分析C-KIT基因突變對(duì)患者預(yù)后的影響： (4)采用等位基因特異性PCR(allele-specific PCR，A

5、S-PCR)方法檢測(cè)此78例患者的JAK2V617F基因突變發(fā)生情況，綜合分析其臨床資料了解兩種基因突變發(fā)生的關(guān)系及對(duì)預(yù)后的影響。 結(jié)果： 78例伴t(8；21)M2患者中共檢出27例(34.6％)發(fā)生了C-KIT基因突變(mutKIT)，其中21例為17號(hào)外顯子突變(mutated KIT in 17 exon，mutKIT17)，5例為8號(hào)外顯子突變(mutated KIT in 8 exon，mutKIT8)，1例

6、8號(hào)與17號(hào)外顯子均具有突變。C-KIT突變主要表現(xiàn)為點(diǎn)突變或復(fù)雜的插入、缺失型突變兩大類型，在這些突變中最常見的是位于C-KII激酶功能域的D816突變占55.6％(15／27)，并新發(fā)現(xiàn)了一種基因突變(D816delinsVVA)。 C-KIT突變型(mutKIT)與野生型(wide-type C-KIT,wtKIT)組患者相比較，前者的外周血白細(xì)胞較高(P<0.05)，兩組的血紅蛋白水平、血小板計(jì)數(shù)、骨髓原始細(xì)胞比例、CD117表

7、達(dá)水平以及年齡、性別的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O．05)。兩組患者誘導(dǎo)治療緩解(CR)率相近，mutKII組患者的2年持續(xù)緩解(CCR)率明顯低于wtKIT組(分別23.9％與55.6％，P<0.05)，但2年總生存(OS)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別33.3％與58.0％，P>0.05)；亞組分析顯示mutKIT17組患者的2年CCR率與OS率均明顯低于wtKIT組(P<0.05)。 在78例伴t(8；21)M2患者中，6例(7.

8、7％)發(fā)生了JAK2V617F突變，無1例患者mutKIT和JAK2V617F同時(shí)發(fā)生。mutKIT／JAK2V617F組與wtKIT／JAK2組患者相比較，前者的白細(xì)胞數(shù)較高(P<0.05)，兩者的CR率相近，前者的2年CCR率明顯低于后者(分別26.7％與56.1％，P<0.05)，但2年總生存(OS)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為34.8％與58.6％，P>0.05)。 結(jié)論： 成人伴t(8；21)M2患者中C-KII

9、基因第8和17號(hào)外顯子的突變類型多樣，其中C-KIT基因密碼子D816突變較多見。C-KIT基因突變患者外周血白細(xì)胞數(shù)量高，CD117表達(dá)水平與C-KIT基因突變狀態(tài)無明顯相關(guān)性；伴有C-KIT突變尤其17號(hào)外顯子突變的患者易復(fù)發(fā)，預(yù)后差。 蛋白酪氨酸激酶家族的相關(guān)基因突變(C-KIT與JAK2V617F基因突變)在伴t(8；21)ME型AML患者中常見，其中C-KIT突變更為多見，但同一類的兩種基因突變很少會(huì)發(fā)生于同一例患者：