北美喬松胚性組織成熟胚形成潛力差異的生化基礎研究.pdf

1、本文通過對北美喬松(Pinus strobus)具有成胚潛力差異的兩細胞系(細胞系01具有成胚潛力，細胞系02不具有成胚潛力) 增殖階段胚性愈傷組織（ET）細胞形態(tài)及結構差異比較，對比分析增殖階段ET生長、蔗糖代謝及蛋白表達情況，探討成熟胚誘導能力差異的形態(tài)學、細胞學和分子生物學基礎，結果表明： 1、兩細胞系ET在增殖培養(yǎng)階段形態(tài)差異不明顯，在ET結構上有差異：01細胞系中存在一種02細胞系缺乏的結構類型ESM4。 2、

2、02細胞系相對生長率RGR在整個增殖階段均高于01細胞系，RGR最大值出現(xiàn)在4-5天；但01細胞系RGR最大值在第3天，比02細胞系略有提前，且在15d時很低，20d時接近于0。 3、兩細胞系增殖階段ET己糖、己糖/蔗糖比值、轉(zhuǎn)化酶活性和RGR之間呈正相關。 4、采用Bradford法測定可溶性蛋白總量：01細胞系ET可溶性蛋白總量高于02細胞系。 5、SDS-PAGE圖譜顯示：兩細胞系ET中均存在分子量大小約為

3、88.8KD，64.2 KD，53.8KD，36.5KD，33.9KD，18.6KD六種蛋白。其中，18.6KD蛋白的表達量01細胞系強于02細胞系，36.5KD蛋白表達量01細胞系弱于02細胞系；02細胞系中存在71.6KD和24.0KD兩種特異蛋白。 本項研究首次較系統(tǒng)地報道了北美喬松由增殖到成熟胚誘導階段的細胞顯微結構，確定了顯微結構觀測可以作為胚性愈傷組織誘導成熟胚潛力的初步診斷方法。 通過北美喬松胚性愈傷組織R