綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞建立大鼠腫瘤模型及透明質(zhì)酸對(duì)其侵襲與增殖的影響.pdf

1、該研究首先采用脂質(zhì)體介導(dǎo)法,在體外將外源性EGFP(Enhanced GreenFluorescent protein)基因轉(zhuǎn)染入C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞,利用含G418的培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞并擴(kuò)增培養(yǎng).將穩(wěn)定轉(zhuǎn)染目的基因和對(duì)照空載體的細(xì)胞分別命名為C6-E-N細(xì)胞和C6-N細(xì)胞.采用流式細(xì)胞儀、透射電鏡檢測(cè)外源基因?qū)D(zhuǎn)染細(xì)胞周期和超微結(jié)構(gòu)的影響:通過(guò)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)和MTT實(shí)驗(yàn),檢測(cè)EGFP基因?qū)D(zhuǎn)染細(xì)胞體外增殖速率和生長(zhǎng)活力的影響:熒光顯微

2、鏡檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞目的基因的表達(dá);裸鼠致瘤性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的體內(nèi)致瘤性改變.研究結(jié)果表明:1.EGFP基因在體外穩(wěn)定轉(zhuǎn)染C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系,對(duì)瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期、超微結(jié)構(gòu)、增殖速率、裸鼠致瘤性均無(wú)明顯影響.轉(zhuǎn)染該基因的C6細(xì)胞在體外可穩(wěn)定表達(dá)EGFP:2.移植C6-E-N細(xì)胞于大鼠腦內(nèi),建立大鼠腦內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞瘤模型,瘤組織呈侵襲性生長(zhǎng),符合膠質(zhì)細(xì)胞瘤體內(nèi)侵襲模型的標(biāo)準(zhǔn),熒光顯微鏡檢測(cè)瘤細(xì)胞的侵襲性,其陽(yáng)性率明顯高于傳統(tǒng)的HE染色和GFAP免疫組