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文檔簡介
1、目的:
本課題組的前期研究表明,重癥乙型肝炎患者中鉀離子通道相關(guān)基因KCNJ15異常高表達。本研究克隆了KCNJ15的啟動子,并探討了HBV編碼的病毒蛋白(HBc、HBs及HBx)對其的激活作用,初步闡明了KCNJ15基因在重癥乙型肝炎中高表達的原因。
方法:
根據(jù)GeneBank中人類KCNJ15基因圖譜設(shè)計引物,以重癥肝炎患者的基因組為模板擴增KCNJ15基因 5' 端;Truncation
2、法確定啟動子全長區(qū)域??寺∑淙L啟動子,構(gòu)建KCNJ15啟動子熒光素酶報告基因質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染CHO和HepG2細胞系,通過檢測熒光素酶相對活性探討HBV編碼蛋白對KCNJ15基因的調(diào)控作用。
結(jié)果:
確定了1170bp的KCNJ15F2片段已經(jīng)包含了KCNJ15基因的全長啟動子;HBV相關(guān)蛋白HBx可增強KCNJ15基因啟動子的活性。
結(jié)論:
研究中,我們確定了KCNJ15基因全長啟動
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