LPS誘導雞幾個炎癥反應相關基因的表達調控研究.pdf

1、雞大腸桿菌病是影響禽業(yè)生產的主要疾病之一，能夠引起不同品系、不同日齡雞多種組織臟器發(fā)生炎癥反應，給養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大經濟損失。本研究以大腸桿菌脂多糖（LPS）作用于海蘭褐雛雞、AA+肉雛雞以及成年產蛋母雞，分析炎癥反應相關基因akirin2、PPARγ、NYGGF4以及miRNA的表達特性，為深入理解炎癥反應分子機制和分子診斷標記物候選基因的篩選提供理論參考。主要研究方法和實驗結果如下：
　　為深入研究雛雞炎癥反應中相關基因的表達特性

2、和調控關系，本實驗分別以AA+肉仔雞和海蘭褐蛋雛雞為研究對象，采用LPS腹腔接種雛雞，72h后收集血液、肝臟、胸腺、法氏囊和脾臟等組織，利用RT-PCR定量分析炎癥相關基因akirin2、PPARγ和幾種miRNA的轉錄活性變化。結果表明：在LPS接種的肉仔雞中，akirin2和PPARγ基因在肝臟和法氏囊中均顯著下調（P<0.01）；在LPS接種的海蘭褐雛雞中，akirin2基因在胸腺中表達顯著上調（P<0.01），而PPARγ基因在

3、各組織中表達均差異不顯著；此外，miR-146a（P<0.05）、miR-21（P<0.01）和miR-155（P<0.01）在LPS接種的2個品系雛雞肝臟中表達均顯著下調。
　　雛雞接種LPS后，在紅細胞中，海蘭褐雛雞的miR-155、miR-146a、miR-181a和miR-21的表達活性均降低，而AA+肉雞卻呈現(xiàn)相反的表達趨勢。在白細胞中，miR-155和miR-21表達均上調，其中，miR-146a和miR-181a在海

4、蘭褐雞中均顯著下調（P<0.05），但在AA+肉雞中均顯著上調（P<0.05）。在血漿中，2個品系雛雞的miR-146a和miR-181a表達活性均顯著下調（P<0.05）。
　　為深入研究雞NYGGF4基因的功能，首先對四個品系雞的NYGGF4基因進行生物信息學分析，然后分析該基因的組織表達特性，最后驗證該基因是否與炎癥反應相關。實驗結果表明：在四個品系雞NYGGF4基因編碼區(qū)內存在8個SNP位點。14日齡海蘭褐雛雞NYGGF4

5、基因在腦中的表達量最高，而在AA+肉雞的肺和脂肪組織中表達量最高，在其他組織中兩個品系雞都具有相似的表達特性。在炎癥反應中，NYGGF4基因在海蘭褐雞和AA+肉雞的肝臟和法氏囊中的表達活性表現(xiàn)出相反的變化。
　　為深入研究成雞輸卵管炎的分子機制，本研究利用LPS制備海蘭褐成年母雞泄殖腔上行性感染急性炎癥反應模型，并定量分析炎性組織相關基因的轉錄活性變化。實驗結果表明：正常母雞akirin2基因在輸卵管各區(qū)段均高表達，而PPARγ基

6、因僅在陰道和卵巢組織中具有較高表達活性。炎癥反應中，akirin2基因在子宮、直腸和盲腸扁桃體中轉錄活性均顯著上調，PPARγ基因僅在子宮中轉錄活性顯著上調（P<0.01），而在直腸（P<0.01）和盲腸扁桃體中轉錄活性下調。
　　本研究表明，akirin2、PPARγ和NYGGF4基因是影響炎癥反應的重要調控基因，研究這些基因在炎癥反應中的表達與調控關系，對于深入理解炎癥反應分子機制具有重要的理論意義。此外，某些miRNAs在炎