慢腎康寧對UUO大鼠腎間質纖維化中TGF-β1-Smad3信號調控的miR-21、miR-29表達的影響.pdf

1、目的：觀察中藥復方慢腎康寧對UUO大鼠腎間質纖維化中TGF-β1/Smad3信號通路介導的miR-21、miR-29表達的影響。
　　方法：60只成年雄性Wistar大鼠在適應性喂養(yǎng)1周后，按體重隨機分為六組（n=10），分別為正常對照組(正常組)、假手術組、UUO模型組（模型組）、纈沙坦組、慢腎康寧高劑量組（MGH組）和慢腎康寧組（MG組）。模型組和各藥物組予行UUO術造模，于左腎下極處結扎后離斷輸尿管；假手術組不結扎離斷輸尿管

2、，僅游離輸尿管后即關閉腹腔。術后3天連續(xù)腹腔注射青霉素用以預防感染。各組均于術前3天開始灌胃給藥，纈沙坦組給予纈沙坦8mg·k g-1·d-1，MGH組給予慢腎康寧30g·kg-1·d-1，MG組給予慢腎康寧15g·kg-1·d-1，余各組予等量生理鹽水灌胃，給藥時間為2周。術后第12天處死大鼠，腹主動脈取血用于檢測CREA和BUN；記錄體重及雙腎濕重；取左側腎組織行HE染色和Masson染色，光鏡下觀察其病理改變；免疫組化方法檢測左腎

3、組織TGF-β1、p-Smad3蛋白表達情況；逆轉錄PCR方法檢測左腎組織TGF-β1、Smad3、Vimentin mRNA和miR-21、miR-29的表達情況。
　　結果：HE染色顯示，正常組及假手術組左腎組織結構正常；模型組左腎組織結構錯亂，小管間隙增寬，內有大量炎性細胞浸潤，Masson染色可見大量膠原纖維交織呈網狀，間質纖維化嚴重；各藥物組與模型組相比較，腎間質中炎性浸潤及膠原面積減少，間質纖維化程度明顯改善。各藥物組

4、腎重/體重值相比模型組均有不同程度的下降（P<0.05)。造模組與假手術組相比，CREA及BUN值均有不同程度升高(P<0.01)，各治療組與模型組相比結果無統計學意義，但有下降趨勢。免疫組化顯示，各藥物組相比模型組，TGF-β1、p-Smad3蛋白表達顯著下降（P<0.01)，MGH組與纈沙坦組優(yōu)于MG組(P<0.01)。Real-time PCR顯示，各藥物組相比模型組，TGF-β1、Smad3、Vimentin mRNA和miR-

5、21表達水平均有不同程度的下調（P<0.05)，miR-29表達水平上調（P<0.05)。
　　結論：UUO大鼠腎間質纖維化模型中TGF-β1/Smad3信號通路被激活；慢腎康寧能抑制UUO大鼠腎間質纖維化模型中TGF-β1/Smad3信號通路，下調TGF-β1、Smad3、miR-21的表達，上調miR-29的表達；慢腎康寧能減輕腎間質纖維化，下調Vimentin的表達，這一過程可能是通過抑制TGF-β1/Smad3信號介導的m