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文檔簡介
1、目的:研究TGF-β1siRNA對CCL4誘導的肝纖維化大鼠Smad蛋白影響。
方法:采用前期構(gòu)建的TGF-β1siRNA治療前后肝纖維化大鼠的肝臟組織作為研究對象,將其分為5組:正常組、模型組、陰性對照組(0.25 mg/kg非特異性靶序列)、TGF-β1siRNA0.125mg/kg組和TGF-β1siRNA0.25 mg/kg組。免疫組織化學和Western blot檢測Smad2、3、4、7的蛋白表達;Real-tim
2、e PCR法檢測Smad2、3、4、7的mRNA表達。
結(jié)果:免疫組織化學結(jié)果顯示TGF-β1siRNA0.25mg/kg組及0.125mg/kg組Smad2/3、4的蛋白表達量較模型組、陰性對照組明顯減少(F值分別為115.538,117.178,P<0.05),TGF-β1siRNA0.25mg/kg組較0.125mg/kg組表達量少(P<0.05);TGF-β1siRNA0.25mg/kg組及0.125mg/kg組Sma
3、d7的蛋白表達量較模型組、陰性對照組增加(F=125.34,P<0.05),TGF-β1siRNA0.25mg/kg組較0.125mg/kg組表達量多(P<0.05),Western blot也顯示相同趨勢。Real-time PCR結(jié)果顯示與模型組和陰性對照組比較,TGF-β1siRNA可以明顯抑制Smad2、3、4基因的表達,且TGF-β1siRNA0.25mg/kg組Smad2、3、4的mRNA表達量較TGF-β1siRNA0.1
4、25mg/kg組明顯減少(P<0.05)。TGF-β1siRNA0.25mg/kg組及0.125mg/kg組Smad7的mRNA表達量較模型組、陰性對照組增加(F=29.615,P<0.05),TGF-β1siRNA0.25mg/kg組較0.125mg/kg組表達量多(P<0.05)。
結(jié)論:TGF-β1siRNA干擾大鼠TGF-131表達后,Smad2、3、4表達量明顯降低,而Smad7表達仍維持在較高水平,這種狀態(tài)有利于肝
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