扶正化瘀抗纖方對(duì)肝纖維化大鼠TGF-β1及PDGF表達(dá)的影響研究.pdf

1、目的：本課題采用四氯化碳法建立肝纖維化大鼠模型，通過(guò)扶正化瘀抗纖方對(duì)造模大鼠進(jìn)行干預(yù)，光鏡下觀察模型大鼠肝臟病理組織結(jié)構(gòu)的變化，并用Western-blot、RT-PCR檢測(cè)肝臟組織中TGF-β1及PDGF的表達(dá)，以探討扶正化瘀抗纖方防治肝纖維化的可能作用機(jī)制。
　　方法：SPF級(jí) Wistar大鼠70只，雄性，體重200±20g，隨機(jī)分為空白組、模型組、熊去氧膽酸組及扶正化瘀抗纖方高、中、低劑量組，空白組10只大鼠，其余組各12

2、只大鼠。采用復(fù)合因素制作大鼠肝纖維化模型，每組除空白組采用正常飼料及飲水外，其余各組采用正常飼料，以10％食用酒精為唯一飲料，腹腔注射40%CCl4橄欖油劑（第1次用5mL/kg，以后每隔3d注射3mL/kg），2次/周，連續(xù)6周。從實(shí)驗(yàn)第一天開(kāi)始，熊去氧膽酸組給藥0.54g/kg灌胃；扶正化瘀抗纖方組予以藥液高劑量18.9g/kg、中劑量9.45g/kg、低劑量4.7g/kg灌胃；空白組和模型組給予等量生理鹽水0.54g/kg灌胃；干

3、預(yù)治療6周后取材。觀察大鼠肝臟大體形態(tài)學(xué)及組織病理學(xué)改變，Western-blot檢測(cè)肝組織TGF-β1及PDGF蛋白表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)肝組織中TGF-β1mRNA及PDGF mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　?、俅笫蟾卫w維化模型的建立：造模干預(yù)6周后，與空白組相比，模型組大鼠肝臟色暗紅，肉眼可見(jiàn)黃色片狀斑塊，質(zhì)地較硬，邊緣鈍；治療各組大鼠肝臟肉眼可見(jiàn)不同程度的黃色斑點(diǎn)，邊緣較鈍，但優(yōu)于模型組。肉眼觀察各治療組肝臟變化，以

4、中藥高劑量組肝纖維化程度最輕，西藥組次之，中藥中劑量組纖維化程度重于西藥組，中藥低劑量組纖維化程度最重；光鏡下觀察HE染色切片，模型組可見(jiàn)有肝細(xì)胞腫脹、變性壞死以及廣泛的纖維增生；治療組大鼠肝組織炎性病理變化均有不同程度的減輕，纖維組織增生減少。提示模型組與各治療組均造模成功，中藥組與西藥組均可對(duì)肝纖維化的發(fā)生發(fā)展起到不同程度的治療作用。
　?、趯⒏深A(yù)前的大鼠體重與6周干預(yù)后的大鼠體重進(jìn)行對(duì)比，空白組大鼠體重自然增長(zhǎng)，與空白組相比

5、，模型組大鼠體重增長(zhǎng)最為緩慢（P<0.05）；模型組與各治療組比較，各治療組的大鼠體重均有所增加，但均低于空白組大鼠正常體重，其中以中藥高劑量組與西藥組體重增長(zhǎng)較為明顯（P<0.01），中藥中劑量組與低劑量組體重增長(zhǎng)比較無(wú)明顯差異（P>0.05）。
　　③肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1、PDGF在Western-blot檢測(cè)中的表達(dá)：空白組中TGF-β1、PDGF均有少量的蛋白表達(dá)，與空白組相比，模型組大鼠肝組織中TGF-β1、P

6、DGF表達(dá)量明顯上升（P<0.05）；與模型組相比，中藥各治療組、西藥組中TGF-β1、PDGF表達(dá)均有所下降（P<0.05），提示干預(yù)措施有效。其中以中藥高劑量組TGF-β1、PDGF的表達(dá)下降顯著（P<0.01），中藥低劑量組治療效果劣于其余各治療組，但優(yōu)于模型組（P<0.05）。TGF-β1的表達(dá)在中藥中劑量組與西藥組中均有所降低（P<0.05），兩組的表達(dá)值相比無(wú)明顯差異（P>0.05）；PDGF在中藥高、中劑量組中的表達(dá)優(yōu)于西

7、藥組（P<0.05）。
　?、躌T-PCR檢測(cè)肝組織中TGF-β1mRNA及PDGF mRNA的表達(dá)：與空白組相比，模型組大鼠肝組織中TGF-β1、PDGF的表達(dá)較正常組織明顯上升（P<0.01），各治療組的表達(dá)值均降低（P<0.05），提示干預(yù)手段有效；其中以中藥高劑量組的TGF-β1表達(dá)下降明顯（P<0.01），中劑量組與西藥組表達(dá)基本等效，相比無(wú)明顯差異（P>0.05），西藥組的表達(dá)優(yōu)于中藥低劑量組（P<0.05）；PDGF