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1、目的:TGFβ1是促進(jìn)肝纖維化發(fā)展的重要因子之一。本課題研究脾切除對(duì)肝纖維化大鼠肝臟TGFβ1的表達(dá)和血清TGFβ1水平的影響,從而探討脾切除在肝纖維化中的作用。 方法:對(duì)大鼠皮下注射CCL<,4>,建立50例肝纖維化大鼠模型。于建模3周,6周,及8周分別取大鼠肝臟和脾臟標(biāo)本。用免疫組化SP方法測(cè)定其TGFβ1的表達(dá),HE和姬姆薩染色檢測(cè)肝纖維化。應(yīng)用雙抗體夾心ELISA方法測(cè)定15例模型大鼠行脾臟切除前后的血清TGFβ1水平,
2、以及15例對(duì)照組大鼠的血清TGFβ1水平,并于術(shù)后4周取兩組大鼠的肝臟標(biāo)本,用免疫組化SP方法測(cè)定其TGFβ1的表達(dá)。應(yīng)用CMIAS8彩色圖像系統(tǒng)對(duì)陽(yáng)性目標(biāo)進(jìn)行分析和處理。 結(jié)果: (1)TGFβ1主要位于肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞胞漿內(nèi),這些細(xì)胞分布在匯管區(qū)、纖維間隔、炎癥區(qū),少數(shù)在肝竇內(nèi)。纖維組織中有少量TGFβ1存在,少數(shù)肝細(xì)胞胞漿內(nèi)也有TGFβ1存在。正常肝組織有少量TGFβ1表達(dá)。大鼠肝纖維化模型的肝臟各個(gè)時(shí)期TGFβ1的積
3、分光密度(10D)值分別為:正常時(shí)(26.81±5.42),造模3周時(shí)(80.21±10.98)。造模6周時(shí)(134.60±12.12),造模8周時(shí)(204.60±15.76)。結(jié)果顯示,隨著肝纖維化的進(jìn)展,肝臟TGFβ1的表達(dá)也隨之增加(P<0.01)。 (2) 在肝纖維化中,TGFβ1主要位于脾臟的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞胞漿內(nèi),在纖維組織中也有少量TGFβ1存在,而在正常脾臟組織的視野內(nèi)也有較少的表達(dá)。大鼠肝纖維化模型的脾臟各個(gè)時(shí)期TG
4、Fβ1的IOD值分別為:正常時(shí)(22.40±4.76),造模3周時(shí)(59.96±10.17),造模6周時(shí)(98.81±7.40),造模8周時(shí)(180.46±11.03)。結(jié)果顯示,隨著肝纖維化的進(jìn)展,脾臟TGFβ1的表達(dá)也隨之增加(P<0.01) 。 (3) 肝纖維化大鼠行脾臟切除術(shù)前,術(shù)后2周,術(shù)后4周其血清TGFβ1的水平分別為(pg/ml):380.565±35.826,394.149±36.297,417.087±31.785.
5、而對(duì)照組大鼠其血清TGFβ1在同一時(shí)期的水平分別為(pg/ml):385.870±35.359,421.014±38.663,442.808±39.228。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,行脾切除術(shù)組大鼠其血清TGF-β1的水平顯著低于對(duì)照組大鼠(P<0.05)。 (4) 肝纖維化模型大鼠行脾切除術(shù)后4周,其肝臟TGFβ1的IOD值為224.35±9.45,對(duì)照組大鼠肝臟TGFβ1的IOD值為240.40±11.73。結(jié)果表明,行脾切除術(shù)組其肝臟
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