銀杏葉提取物對(duì)肝纖維化大鼠肝臟TGF-β-Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響的研究.pdf

1、目的：觀察銀杏葉提取物(GbE)抗 CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的作用及其對(duì)肝組織TGFβ/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中相關(guān)分子表達(dá)的影響，探討其抗肝纖維化的作用機(jī)制。
　　方法：雄性SD大鼠60只隨機(jī)分為6組，即正常組、模型組、GbE高劑量組、GbE中劑量組、GbE低劑量組及復(fù)方鱉甲軟肝片組，每組10只；正常組皮下注射橄欖油(3ml/kg)，其余各組均皮下注射橄欖油配制的40％CCl4(3ml/kg)，每周2次，共6周，首次加倍；GbE

2、高、中、低劑量組在造模的同時(shí)分別給以200mg/（kg?d）、100mg/（kg?d）、50mg/（kg?d）的GbE灌胃，復(fù)方鱉甲軟肝片組以1g/（kg?d）的復(fù)方鱉甲軟肝片混懸液灌胃，正常組和模型組以等容量蒸餾水灌胃。6周末處死大鼠，HE和Masson染色光鏡觀察各組大鼠肝組織的病理改變；全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清ALT、AST、ALP水平；免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)大鼠肝組織中TGF-β1、α-SMA、Smad2/3、7及TβRⅠ、Ⅱ、

3、Ⅲ蛋白表達(dá)；RT-PCR法檢測(cè)TGF-β1mRNA表達(dá)；原位雜位法檢測(cè)大鼠肝組織中Smad2/3、7mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：①模型組大鼠肝組織炎癥程度計(jì)分和纖維化程度計(jì)分明顯高于正常組(P<0.01)，GbE高劑量組、GbE中劑量組、GbE低劑量組和復(fù)方鱉甲軟肝片組大鼠肝組織的炎癥分布程度和纖維化程度均較模型組明顯減輕(P<0.01，P<0.05)；②模型組大鼠的血清ALT、AST、ALP水平較正常組明顯增高（P<0.01），G

4、bE高劑量組、GbE中劑量組、GbE低劑量組和復(fù)方鱉甲軟肝片組大鼠的血清ALT、AST水平較模型組大鼠明顯降低（P<0.05，P<0.01），GbE高劑量組、GbE中劑量組大鼠的ALP水平明顯低于模型組(P<0.05，P<0.01)；③模型組大鼠α-SMA蛋白表達(dá)較正常組明顯增強(qiáng)(P＜0.01)，GbE高、中、低劑量組和復(fù)方鱉甲軟肝片組α-SMA蛋白表達(dá)較模型組明顯減少(P＜0.05，P＜0.01)；④模型組肝組織TGF-β1mRNA和

5、蛋白表達(dá)均較正常組明顯增高(P＜0.01)，應(yīng)用不同劑量的GbE及復(fù)方鱉甲軟肝片干預(yù)后大鼠肝組織TGF-β1mRNA和蛋白的表達(dá)均明顯減少（P＜0.01）；⑤模型組肝組織Smad2/3、Smad7 mRNA和蛋白表達(dá)均較正常組明顯增高(P＜0.01，P＜0.05）。應(yīng)用不同劑量的GbE及復(fù)方鱉甲軟肝片干預(yù)后，大鼠肝組織Smad2/3mRNA和蛋白的表達(dá)均較模型組明顯減少（P＜0.05，P＜0.01），而Smad7mRNA 表達(dá)

6、較模型組明顯增高（P＜0.05）；⑥模型組肝組織TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ表達(dá)均較正常組明顯增高(P＜0.01)。應(yīng)用不同劑量的GbE及復(fù)方鱉甲軟肝片干預(yù)后，大鼠肝組織TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ表達(dá)均較模型組明顯減少（P＜0.05）。
　　結(jié)論：①GbE具有一定保護(hù)肝細(xì)胞、改善肝功能作用，能顯著改善CCl4肝纖維化病大鼠肝組織炎癥損傷；②GbE可抑制 HSC活化，明顯減輕肝組織纖維化程度。③CCl4誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化存在著TGF-β/Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)