催乳素及其受體與CD154表達(dá)及Th1-Th2細(xì)胞因子失衡之間的關(guān)聯(lián).pdf

1、目的：探討催乳素(Prolactin，PRL)/催乳素受體(PRLr)途徑與免疫細(xì)胞活化有關(guān)的協(xié)同刺激信號(hào)間的關(guān)系，及對(duì)Th1/Th2細(xì)胞因子分泌失衡的影響，以期發(fā)現(xiàn)：PRL/PRLr在免疫調(diào)節(jié)方面的作用機(jī)制。 方法：1．以具備同時(shí)表達(dá)。PRLr及CDl54的人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株Jurkat D1.1為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，將JurkatDl.1細(xì)胞隨機(jī)分為4組，用重組人催乳素(rhPRL)及植物血凝素(PHA)共同刺激JurkatDl

2、.1細(xì)胞，預(yù)先加或不加鼠抗人催乳素受體抗體，流式細(xì)胞儀檢測(cè)JurkatDl.1細(xì)胞表面抗原CDl54的表達(dá)。免疫組化法再次證實(shí)以上結(jié)果。2．分別用不同濃度rhPRL及PHA共同刺激JurkatDl.1細(xì)胞，預(yù)先加入或不加入鼠抗人催乳素受體抗體，培養(yǎng)24小時(shí)后，收集上清，ELISA檢測(cè)白細(xì)胞介素-4(IL-4)、γ-干擾素(IFN-γ)濃度。3．采用免疫組化方法檢測(cè)28例系統(tǒng)性硬皮病(Systemic sclerosis,SSc)患者和正

3、常人皮膚組織中PRL、PRLr、IFN-γ、IL-4，并分析上述指標(biāo)間的相關(guān)性。 結(jié)果：1．在rhPRL和PHA共同作用下，Jurkat細(xì)胞CD154表達(dá)量(20.8±7.0)％較空白對(duì)照組(2.6±0.5)％明顯增加(t=8.84，P<0.001)。預(yù)先加入鼠抗人催乳素受體抗體后再加入rhPRL和PHA，CD154的表達(dá)量(2.6±0.6)％無明顯升高(t=0.04，P>0,05)。2.PRL對(duì)Jurkat細(xì)胞IL-4的分泌無

4、明顯影響(P>0.05)。隨著rhPRL刺激濃度的增加，Jurkat細(xì)胞IFN-γ分泌量逐漸增加，呈劑量依賴性，各組差異有顯著性(P<0.05)。預(yù)先加入鼠抗人催乳素受體抗體，Jurkat細(xì)胞IFN-γ分泌量無明顯變化(P>0.05)。3.PRL、PRLr表達(dá)于皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞，汗管內(nèi)皮及淺層細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞。SSc組PRL的表達(dá)高于正常對(duì)照組(P<0.001)，PRLr的表達(dá)在兩組間無差別(P>0.5)。IFN-γ、IL-4見于皮膚

5、角質(zhì)形成細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、浸潤(rùn)的淋巴細(xì)胞。SSc組IL-4的表達(dá)高于正常對(duì)照組(P<0.001)，IFN-γ在兩組間的表達(dá)無差別(P>0.1)。SSc組中PRL與IL-4的表達(dá)正相關(guān)(r<,s>=0.893，P<0.001)。 結(jié)論：1．PRL可能是通過刺激T細(xì)胞CD154的表達(dá)、參與Th1/Th2細(xì)胞因子分泌的失衡而調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。這些作用是通過PRL/PRLr途徑介導(dǎo)的。2.SSc患者皮損表達(dá)PRL及PRLr，皮損局部存在T