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文檔簡介
1、人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)是導(dǎo)致人獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的病原體。我國HIV/AIDS流行呈快速上升趨勢。HIV分為HIV-1和HIV-2型,HIV-1的M群至少包含11個(gè)亞型,其中CRF01-AE重組型在全國所占比例也有所增加,在上海HIV-1CRF01-AE重組型為主要的流行株。HIV感染和丙型肝炎病毒感染有著相似的傳播途徑如經(jīng)血傳播、性傳播和母嬰傳播,因此HIV和HCV混合感染很常見。 本研究中,我們應(yīng)用
2、巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法,分段擴(kuò)增HIV-1近全長基因組相應(yīng)片段,進(jìn)行克隆、測序,并進(jìn)行遺傳進(jìn)化樹和序列斷點(diǎn)位置。我們還對186份HCV病毒載量大于1000拷貝/ml的來自于河南、云南、新疆維吾爾自治區(qū)、吉林和遼寧省HIV-1/HCV合并感染人群標(biāo)本,用逆轉(zhuǎn)錄套式聚合酶鏈反應(yīng)方法擴(kuò)增病人血漿HCV核心基因區(qū)并進(jìn)行基因亞型分型,同時(shí)檢測病人的HIV-1和HCV載量以及CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)。主要結(jié)果如下: 1、完成了
3、5株HIV-1CRF01-AE、1株URF01-AE/B近全基因組克隆,建立了HIV-1CRF01-AE、URF01-AE/B近全基因組擴(kuò)增平臺(tái)。 2、系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,所有5條近全長基因序列與CRF-01AE參考株聚在一起.pol、gag、env三個(gè)結(jié)構(gòu)基因區(qū)的組內(nèi)基因離散率均低于泰國分離株;所有克隆序列未出現(xiàn)基因水平的重組,對蛋白酶和逆轉(zhuǎn)錄酶的藥物依然敏感。 3、一株為由CRF01_AE和HIV-1B’亞型嵌合組成
4、,兩者各占約50%。其多聚酶蛋白基因(Pol)和外膜糖蛋白基因(Env)區(qū)均有HIV-1B’亞型片段和CRF01_AE片段嵌合組成。2種亞型病毒DNA片段嵌合點(diǎn)的位置與過去報(bào)道的重組病毒株(CRF15_AE/B、CRF33_AE/B和CRF34_AE/B)均不同。 4、HCV不同基因亞型比例分別為1a(1.2%),1b(39.9%),2a(17.9%),3a(10.4%),3b(15.6%),6a(1.2%),6n(6.4%)和
5、6型未鑒定亞型(7.5%)。 5、HCV1b(69例)和2a(31例)主要流行于河南省既往有償獻(xiàn)血漿人員中;3a(18例)和3b(26例)亞型主要流行于新疆和云南靜脈注射吸毒人員(IDU)中;HCV6型(26例)主要流行于云南吸毒人員中; 6、1b型(69例)的HCV RNA水平顯著高于非1b亞型(104例)(P<0.05),但在HIV-1載量和CD4+T細(xì)胞數(shù)方面沒有顯著性差異(P>0.05)。2a亞型(31例)的HI
6、V-1 RNA和HCV RNA水平顯著低于非2a亞型(142例)(P<0.05)。 7、HIV-1/HCV合并感染人群中HCV基因亞型的流行和分布與流行地區(qū)和感染途徑有關(guān)。新的HCV6型亞型(13例)病毒株已經(jīng)在合并感染的IDU人群中存在。HCV基因亞型與HIV感染的疾病進(jìn)展之間無明顯相關(guān)性研究。首次開展了上海市HIV-1CRF01-AE流行株、URF01-AE/B的近全基因組克隆及及序列測定,為本型病毒的病原學(xué)、變異特征、疫苗
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