DEHP的遺傳素性和誘導(dǎo)哮喘發(fā)病機(jī)理的初步研究.pdf

1、進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)，伴隨著我國(guó)塑料工業(yè)的高速發(fā)展，增塑劑鄰苯二甲酸酯工業(yè)也在快速發(fā)展著，目前中國(guó)的年產(chǎn)量已經(jīng)超過(guò)日本，僅次于美國(guó)，名列世界第二位。更為重要的是我國(guó)鄰苯二甲酸酯消費(fèi)量已經(jīng)超過(guò)美國(guó)，成為全球第一消費(fèi)大國(guó)，我國(guó)居民體內(nèi)鄰苯二甲酸酯類(lèi)化合物的負(fù)荷量正在快速增長(zhǎng)。大量研究結(jié)果表明，鄰苯二甲酸酯類(lèi)化合物可通過(guò)多種途徑進(jìn)入生物體內(nèi)產(chǎn)生毒性作用。鄰苯二甲酸二乙基己酯(di-(2-ethylhexyl)phthalatc，DEHP)，是目前

2、使用最為廣泛的一種鄰苯二甲酸酯類(lèi)，在塑料工業(yè)中是最主要的增塑劑。關(guān)于DEHP毒性的研究是目前國(guó)際上環(huán)境醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)和難題。本課題主要探討DEHP在誘發(fā)哮喘和哮喘發(fā)病機(jī)理方面的作用及遺傳毒性，這對(duì)全面和系統(tǒng)的了解DEHP毒性具有十分重要的意義。本研究以Wistar大鼠為研究對(duì)象，通過(guò)DEHP灌胃染毒建立DEHP誘導(dǎo)型大鼠哮喘模型檢測(cè)大鼠肺功能、嗜酸粒細(xì)胞數(shù)目和肺組織切片來(lái)探討DEHP誘發(fā)哮喘的發(fā)病機(jī)理同時(shí)用SDS-KCI實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DEHP

3、對(duì)大鼠肝細(xì)胞的遺傳毒性。研究結(jié)果如下： 1.DEHP致DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)效應(yīng) 在正常細(xì)胞中存在著一定量的DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)(DNA-protcin crosslinks，DPC)。這是DNA與核蛋白的正常聯(lián)系或其代謝的結(jié)果，對(duì)維持細(xì)胞的正?；顒?dòng)具有重要作用，當(dāng)有外來(lái)物理、化學(xué)因素作用時(shí)，則可誘導(dǎo)出過(guò)量的DPC。DPC與其他DNA損傷相比，較難修復(fù)，且DPC僅可發(fā)生在單鏈DNA上，這表明這種交聯(lián)只能發(fā)生在DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄期

4、間，因此DPC的形成，必將對(duì)DNA的構(gòu)象和功能(復(fù)制與轉(zhuǎn)錄)產(chǎn)生嚴(yán)重的影響，并在其復(fù)制過(guò)程中容易造成某些重要基因(如抑癌基因)的丟失，導(dǎo)致腫瘤或某些嚴(yán)重疾病的發(fā)生?？梢?jiàn)DPC過(guò)度增加是一種病理現(xiàn)象，是DNA分子的一種嚴(yán)重的遺傳損傷。本研究以大鼠肝細(xì)胞為材料，采用SDS-KCI沉淀法對(duì)DEHP致DPC效應(yīng)進(jìn)行了研究。本研究證實(shí)了較高濃度的DEHP(70 mg·kg-1·d1-)可誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞產(chǎn)生DPC。 2.DEHP誘導(dǎo)大鼠哮喘

5、的可能機(jī)理 哮喘是一種常見(jiàn)的慢性呼吸道疾病。WHO把哮喘定為終身性疾病，哮喘給世界各國(guó)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。近40年來(lái)，哮喘的發(fā)病率和死亡率在世界各地持續(xù)增長(zhǎng)，而空氣污染物被懷疑是主要原因，但其誘發(fā)過(guò)敏性哮喘的分子機(jī)理不清楚，揭示哮喘的分子機(jī)理不但有重要理論意義，也有重要的社會(huì)意義。 流行病學(xué)研究表明DEHP可誘發(fā)人類(lèi)的過(guò)敏癥狀甚而哮喘，然而B(niǎo)utala等的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明DEHP本身并不是過(guò)敏原，經(jīng)DEHP暴露的小鼠體內(nèi)并沒(méi)

6、有檢測(cè)到DEHP特異性IgE。這提示我們DEHP可能通過(guò)其他的途徑誘導(dǎo)哮喘的發(fā)生，根據(jù)本課題組的理論研究和實(shí)驗(yàn)研究，我們提出了“過(guò)敏體質(zhì)激發(fā)原”和“獲得性過(guò)敏體質(zhì)”假說(shuō)，我們假設(shè)以DEHP為代表的鄰苯二甲酸酯在哮喘發(fā)生的過(guò)程中發(fā)揮的是“過(guò)敏體質(zhì)激發(fā)原”作用，其可能使機(jī)體總IgE升高，即形成“獲得性過(guò)敏體質(zhì)”，在遇到較低水平的過(guò)敏原時(shí)即能誘發(fā)哮喘。 本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示經(jīng)DEHP灌胃染毒的大鼠本身并不能引發(fā)哮喘，只有在灌胃染毒的同時(shí)