轉(zhuǎn)基因小鼠胰島細(xì)胞瘤鑒定及發(fā)病機(jī)理的初步研究.pdf

1、胰島細(xì)胞瘤是胰腺內(nèi)分泌腫瘤中的一種，臨床上比較少見(jiàn)。由于臨床表現(xiàn)多樣，易出現(xiàn)診斷錯(cuò)誤。目前關(guān)于胰島細(xì)胞瘤的早期診斷治療的報(bào)道較少，并且關(guān)于其發(fā)病機(jī)理的分子生物學(xué)研究尚未完全清楚。Simian Vires40(SV40)屬于多瘤病毒屬，其早期基因編碼產(chǎn)物大T抗原(SV40Tag)具有致癌性。研究表明，通過(guò)注射SV40Tag，可建立起胰腺腫瘤，骨肉瘤，膀胱瘤以及肝癌的倉(cāng)鼠模型。 本文利用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)中的Tet-on系統(tǒng)與pTRE-

2、SV40Tag重組質(zhì)粒共同對(duì)FVB小鼠進(jìn)行精胚胎的雄原核顯微注射，經(jīng)PCR和Southern檢測(cè)獲得陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因小鼠。通過(guò)飲水添加Dox進(jìn)行誘導(dǎo)的雙陽(yáng)性小鼠在胰腺和腦中檢測(cè)到SV40Tag表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)沒(méi)有Dox誘導(dǎo)的雙陽(yáng)性小鼠胰腺內(nèi)也有SV40Tag表達(dá)。百分之六十的雙陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因小鼠在20周后出現(xiàn)四肢無(wú)力，消瘦，腹部腫大等現(xiàn)象。通過(guò)血糖測(cè)試以及胰島素敏感性測(cè)試發(fā)現(xiàn)上述小鼠出現(xiàn)胰島素分泌紊亂癥狀。剖腹觀(guān)察見(jiàn)有胰腺腫瘤形成。組織病理學(xué)，分子標(biāo)

3、記和免疫組織化學(xué)分析證明該腫瘤為源自胰腺胰島細(xì)胞的胰島細(xì)胞瘤利用real-time PCR方法與免疫共沉淀等方法對(duì)該模型的基因表達(dá)變化進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，IGF通路有明顯變化，且SV40Tag與IGF通路中的IRS-1能以復(fù)合物的形式存在。 綜上，本研究成功建立pTet-on/pTRE-SV40Tag轉(zhuǎn)基因小鼠胰島細(xì)胞瘤模型，并對(duì)其發(fā)病機(jī)理進(jìn)行了初步探討。這將對(duì)SV40的致瘤機(jī)理以及胰島細(xì)胞瘤的防御，臨床診斷以及治療提供一定的依