全反式維甲酸抑制轉(zhuǎn)基因小鼠髓母細(xì)胞瘤生長機制研究.pdf

1、背景：髓母細(xì)胞瘤(Medulloblastoma)是一種小腦神經(jīng)上皮腫瘤，是最常見的兒童中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，70％患者生存期能達到5年，但是也有一部分高?；颊叱０l(fā)生轉(zhuǎn)移，75％的這類患者生存期不超過5年。全反式維甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)，是目前用于臨床腫瘤化學(xué)治療及預(yù)防較為成熟的維甲類藥物，它具有廣泛的抗增殖及促分化活性，能夠抑制多種不同類型腫瘤細(xì)胞的惡性生長。 目的：本文主要探討ATRA對

2、髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系MB39細(xì)胞增殖生存的影響及其作用途徑。 方法：用ATRA處理MB39細(xì)胞，通過CCK-8實驗繪制細(xì)胞生長曲線以考察ATRA對細(xì)胞增殖的抑制作用；采用流式細(xì)胞術(shù)(FITC/PI雙標(biāo)記實驗和caspase-3標(biāo)記實驗)檢測ATRA處理后MB39細(xì)胞凋亡狀況；Western blotting檢測IRS-1，PI3K，Akt，p-Akt，NF-κB，IKKα，IκBα以及Bax，Bcl-2的表達變化情況。嘗試體外培養(yǎng)分

3、離MB39干細(xì)胞，細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測簽定干細(xì)胞，并進一步研究ATRA對于MB39干細(xì)胞的影響。 結(jié)果：MB39細(xì)胞經(jīng)ATRA給藥處理后，細(xì)胞增殖受到明顯抑制。光鏡觀察到誘導(dǎo)前的MB39細(xì)胞呈正常的成纖維細(xì)胞形態(tài)，而誘導(dǎo)后的MB39細(xì)胞表現(xiàn)明顯的凋亡特征，caspase-3表達明顯上升。Western blotting檢測ATRA處理24小時后IRS-1，PI3K，Akt，p-Akt，NF-κB，Bcl-2的表達顯著下調(diào)；IKK