全反式維甲酸對葉酸受體β的調(diào)節(jié)及其作用機制研究.pdf

1、背景:葉酸受體(folate receptor，F(xiàn)R)是一種介導細胞內(nèi)化，將葉酸攝取入真核細胞胞漿的高親和力受體。葉酸受體在腫瘤細胞的高表達使其在腫瘤的分子靶向治療中具有廣闊應(yīng)用前景，研究葉酸受體的調(diào)控對加強其靶向性具有重要意義。 目的:研究全反式維甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)對KG-1細胞FR-β表達的調(diào)節(jié)及其作用機制。 實驗設(shè)計： 1．研究ATRA等誘導分化劑對KG-1等8

2、種瘤細胞系FR-β蛋白表達的影響； 2．ATRA等分化劑對FR-β mRNA的影響； 3．ATRA等分化劑對葉酸受體基因表達相關(guān)通路的研究。 方法：用葉酸結(jié)合實驗、流式細胞儀、WesternBlot等方法研究不同濃度ATRA在不同時間點對多種瘤細胞表面FR-β蛋白的影響；通過實時定量RT-PER檢測FR-β mRNA的變化；進一步通過不同維甲酸類受體激活劑和抑制劑對FR-β的影響來研究ATRA影響FR-β表達的核

3、受體途徑。 結(jié)果： 1、ATRA可誘導KG-1等細胞系FR-β蛋白的表達，且在一定范圍內(nèi)呈劑量依賴性(10-9mol/L-10-6mol/L)；但ATRA對KG-1a，NB4，HL60，293，L1210，JAR，Hela的FR-β蛋白表達無明顯影響。 2、ATRA在10-6mol/L作用于KG-1細胞5天可使FR-β mRNA表達升高，去除ATRA后可使FR-β mRNA表達下降，呈可逆性。 3、維甲酸

4、受體RARα激活劑CD336、RARγ激活劑CD2781可誘導KG-1細胞FR-β的表達，而RARβ和RXRs不能。 結(jié)論： 1、ATRA可上調(diào)KG-1細胞FR-β表達，該過程呈可逆性；ATRA誘導KG-1細胞FR-β蛋白的表達在一定濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴性。 2、ATRA可誘導FR-β mRNA表達增高。 3、ATRA對KG-1細胞FR-β基因的調(diào)節(jié)可能與維甲酸核受體RARα和RARγ有關(guān)，而與RARβ和