姜黃素衍生物B6在大鼠體內(nèi)藥動學及其調血脂、脂肪肝保護的研究.pdf

1、目的：建立測定大鼠血漿中姜黃素衍生物B6濃度的高效液相色譜分析方法;以高效液相色譜法研究姜黃素衍生物B6在大鼠體內(nèi)的藥代動力學;采用灌胃的給藥方式來研究姜黃素衍生物B6對高脂飼料喂養(yǎng)大鼠的調血脂、脂肪肝保護作用。
　　方法：
　?、俳PLC檢測方法:高效液相色譜儀為Agilent1100系列;色譜柱選用ZORBAX SB-C18(4.6×150 mm，5μm);以乙腈-H2O=82∶18(V/V)為流動相;以姜黃素衍生物

2、C65為內(nèi)標，血漿經(jīng)正己烷萃取后，氮氣吹干，用乙腈∶水(82∶18V/V)復溶;流速1 mL·min-1;柱溫45℃;檢測波長324nm，參比波長:380 nm;對血漿中的姜黃素衍生物B6進行檢測。
　?、谒巹訉W實驗:24只♂SD大鼠隨機分成3組，每組8只，分別以靜脈注射(iv)、腹腔注射(ip)和灌胃(ig)3種方式給藥，用建立的HPLC方法，測定大鼠血漿中姜黃素衍生物B6的濃度。iv、ip和ig后血漿藥物濃度的數(shù)據(jù)經(jīng)DAS2.

3、0程序處理，用非房室模型估算藥動學數(shù)據(jù)。以AUC(0-∞)計算生物利用度。
　?、劢笛?、脂肪肝保護作用實驗:將60只♂SD大鼠隨機分成基礎飼料組、高脂飼料組、B6高劑量組、B6低劑量組、姜黃素組，每組各12只。B6高劑量組、B6低劑量組、姜黃素組給予高脂飼料，B6高劑量組按4 mg·kg-1·d-1 ig，B6低劑量組按2 mg·kg-1·d-1 ig，姜黃素組按100 mg·kg-1·d-1 ig;各組均自由飲食，每周測體重一

4、次，連續(xù)8周后處死，取肝臟稱重，做病理切片，采血進行血脂檢測。
　?、芗毙远拘栽囼?6只ICR小鼠，每只ig B63g/kg，給藥后自由飲食，連續(xù)觀察3天。
　　結果：
　?、俜椒▽W結果:B6和內(nèi)標C65出峰干凈利落，峰形良好，分離完全，無雜質峰干擾， B6保留時間4.9 min，C65保留時間為4.3 min。B6在0.01-2.5μg·mL-1范圍內(nèi)線性關系良好(r=0.9999);最低檢測限為0.010μg·mL

5、-1，平均相對回收率(104.95±3.09)％;平均絕對回收率為（76.94±1.57）％;日內(nèi)精密度RSD小于5％，日間精密度RSD小于15％，可用于B6藥動學檢測。
　?、谒巹訉W結果:大鼠B6 iv(10 mg·kg-1)、ip(20 mg·kg-1)和ig(20 mg·kg-1)給藥后的Cmax分別為(1.566±0.331)mg·L-1、(0.1400±0.017)mg·L-1、(0.069±0.011)mg·L-1，T

6、max分別為3 min，15 min，30 min; t1/2z分別為(170.291±57.273) min,(134.873±39.375) min,(143.535±48.375) min;AUC(0-t)分別為(44.578±4.342) mg·min·L-1,(9.479±1.058) mg·min·L-1,(7.334±1.901)mg·min·L-1; AUC(0-∞)分別為(50.312±6.415) mg·min·L-

7、1,(11.079±1.144) mg·min·L-1，(8.899±2.247) mg·min·L-1; B6在大鼠體內(nèi)的ig生物利用度F=(8.884±0.879)％。ip生物利用度F=(11.103±0.962)％。
　?、鄹闻K病理切片結果基礎飼料組、B6高劑量組、B6低劑量組和姜黃素組肝小葉結構完整，肝細胞索排列整齊，肝細胞內(nèi)偶見脂滴及水樣變性。高脂飼料組形成以小泡為主的脂肪變伴水樣變性，發(fā)生不同程度的肝小葉內(nèi)炎癥，肝細胞

8、濁腫、氣球樣變、點或灶狀壞死，并偶見不同程度纖維化。
　?、苎绑w重結果高脂飼料組血漿中甘油三脂、總膽固醇、Apo-b含量明顯高于其它各組。高脂飼料組肝重明顯高于其它各組?；A飼料組體重增加明顯小于其他各組，高脂飼料組、姜黃組、B6組則無明顯差異。
　?、菁毙远拘栽囼炘谟^察期間無1只小鼠死亡，所有觀察指標均無異常。
　　結論：
　?、俦狙芯拷⒌腍PLC法具有快速、簡便、靈敏、精密度高，可用于大鼠血漿中B6的檢