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1、 目的:本實(shí)驗(yàn)以去除卵巢制作小鼠骨質(zhì)疏松癥模型,通過(guò)免疫組織化學(xué)染色測(cè)定骨組織中NF-KBP65及IL-6的蛋白含量及表達(dá)水平并進(jìn)行細(xì)胞定位,探討骨微環(huán)境中核因子及相關(guān)細(xì)胞因子與骨質(zhì)疏松癥發(fā)病過(guò)程中的關(guān)系及意義?! 》椒ǎ?.4月齡同批成年雌性balb/c小鼠20只,體重19~21g,隨機(jī)分兩組。2.于去勢(shì)后3個(gè)月各取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組balb/c小鼠各10只,置于DPX-L型Lunar雙光子骨密儀上通過(guò)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)中心動(dòng)物軟件測(cè)量每只小
2、鼠全身骨密度(BMD)。3.動(dòng)物處死后,立即無(wú)菌操作取左側(cè)股骨下段,迅速放入新鮮配制的4﹪多聚甲醛固定液中,免疫組織化學(xué)染色及觀察。隨機(jī)引物法標(biāo)記探針,采用地高辛標(biāo)記的NF-KBP65cDNA探針作為原位雜交檢測(cè)其mRNA的探針。4.結(jié)果判定與圖像分析統(tǒng)計(jì)學(xué)分析小鼠全身骨密度、核因子NF-KBP65和IL-6蛋白含量表達(dá)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,進(jìn)行t檢驗(yàn)和相關(guān)性分析?! 〗Y(jié)論:骨質(zhì)疏松骨組織中核因子和IL-6表達(dá)增高,骨密度有
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